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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 小小的问题
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婉柳

新虫 (小有名气)

[求助] 小小的问题 已有1人参与

手里有一条转录组测序库里的序列，但是这条序列没有完整的ORF框，想问一下，像这种没有完整ORF框的序列，能克隆出来吗？

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1楼 2020-05-09 20:17:14
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等你的时候

新虫 (初入文坛)
你好，你是想克隆这段序还是需要克隆ORF全长呢？

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

婉柳
2楼2020-05-10 00:05:48
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婉柳

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 等你的时候 at 2020-05-10 00:05:48
你好，你是想克隆这段序还是需要克隆ORF全长呢？

目前只想克隆这段序列

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3楼2020-05-10 08:57:13
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zxd95

至尊木虫 (著名写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2020-05-11 08:05:19
设计引物，rt-PCR，连t载体即可。

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追梦的人
4楼2020-05-10 11:10:29
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等你的时候

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 婉柳 at 2020-05-10 08:57:13
目前只想克隆这段序列
...

如果只想克隆这段序列，  可以先分析预测出可以编码基因的编码区序列，   然后在编码区内部设计扩增引物； 扩增模板要用该目的基因可以表达的RNA逆转录后的cDNA。
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5楼2020-05-23 22:52:37
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