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扫雪煎茶

铜虫 (正式写手)

[求助] 组氨酸标签不表达 已有1人参与

目的基因和载体pET15b用的都是NdeI和BamHI双酶切,连接后进行转化,但测序发现目的基因有了,但是前面的组氨酸标签没表达,对比了碱基序列,发现克隆后的序列中NdeI的识别位点CATATG的第一个T不见了,请问这是为什么啊?救救小白吧@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
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0大坏熊0

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
刚好在酶切位点这里突变听起来有点诡异啊,有没有重新酶切连接,并且对原始质粒做过测序?确认了空载体没问题就可以再做一次酶切连接就好呀

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2020-05-04 21:28:23
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扫雪煎茶

铜虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 0大坏熊0 at 2020-05-04 21:28:23
刚好在酶切位点这里突变听起来有点诡异啊,有没有重新酶切连接,并且对原始质粒做过测序?确认了空载体没问题就可以再做一次酶切连接就好呀

谢谢回复!遇到这种情况不知道为什么,还没有重复。空载体别人用的都正常也就没测序了

发自小木虫Android客户端
3楼2020-05-05 00:05:00
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