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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 组氨酸标签不表达
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扫雪煎茶

铜虫 (正式写手)

[求助] 组氨酸标签不表达 已有1人参与

目的基因和载体pET15b用的都是NdeI和BamHI双酶切，连接后进行转化，但测序发现目的基因有了，但是前面的组氨酸标签没表达，对比了碱基序列，发现克隆后的序列中NdeI的识别位点CATATG的第一个T不见了，请问这是为什么啊？救救小白吧@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
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1楼 2020-05-04 12:25:12
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0大坏熊0

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
刚好在酶切位点这里突变听起来有点诡异啊，有没有重新酶切连接，并且对原始质粒做过测序？确认了空载体没问题就可以再做一次酶切连接就好呀
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扫雪煎茶
2楼2020-05-04 21:28:23
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扫雪煎茶

铜虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 0大坏熊0 at 2020-05-04 21:28:23
刚好在酶切位点这里突变听起来有点诡异啊，有没有重新酶切连接，并且对原始质粒做过测序？确认了空载体没问题就可以再做一次酶切连接就好呀

谢谢回复！遇到这种情况不知道为什么，还没有重复。空载体别人用的都正常也就没测序了

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3楼2020-05-05 00:05:00
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