| 查看: 748 | 回复: 0 | ||
[求助]
LR重组出现了问题，求助
|
|
在寒假前BP重组构建了一批pDONR质粒，挑单克隆之后提了质粒送去测序。 测序用的是pDONR引物，结果是正确的，能blast出相应产物。 之后用这批pDONR去做LR重组，长的菌不是特别多，挑取单克隆后提质粒，然后去转染293T。但是转染的细胞做wb没有条带，什么条带都没有，连csfb条带也没有。 之后又挑菌做了菌液PCR，用的是扩增目的基因的时候使用的引物，没有扩出任何条带。 又重新换酶做了LR重组，克隆子也没有任何菌液PCR条带。 可能是什么地方出了问题呢？ 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有242人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
-
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
-
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复