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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » RNA Probe 制备的问题
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xiaoyuyf

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你提质粒的时候用试剂盒，一般用过夜培养物3ml，最后用50 ul洗脱得到的质粒，然后将100ul的质粒进行过夜酶切，然后进行切胶回收，回收的时候，如果用试剂盒的话，最后一步最好是洗脱温度提高一点（温度由你的盒子说明书上指定，一般是55-65度）。这样得到的浓度就很高了。如果这样浓度还是不够的话，利用正丁醇可以进行体积浓缩，正丁醇很容易就挥发掉了。一般用不到正丁醇这步。
一般roche的酶的效率比较高，你配合roche的RNA纯化柱，标的探针能用5次以上。
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11楼2009-07-08 15:44:12
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xutao

金虫 (著名写手)

第三军团总参谋
引用回帖:
Originally posted by xiaoyuyf at 2009-7-8 15:44:
你提质粒的时候用试剂盒，一般用过夜培养物3ml，最后用50 ul洗脱得到的质粒，然后将100ul的质粒进行过夜酶切，然后进行切胶回收，回收的时候，如果用试剂盒的话，最后一步最好是洗脱温度提高一点（温度由你的盒子 ...

好的，谢谢你
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第三军团
12楼2009-07-09 10:34:40
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