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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)

[交流] 关于信号肽分泌表达的一个问题

我的外源基因有信号肽+一段序列(前肽)+成熟肽三个部分,现在表达载体上有信号肽,那我只能将前肽+成熟肽一起装到载体上,但也有人说只需要成熟肽部分,老板的意思是要将前肽和成熟肽一起装进去,我想问一下哪个是正确的呢?

前肽和成熟肽表达后需要进行切割分开,而我要的是后面部分,这个目前研究的进展如何,听别人说也是很复杂的问题,请了解的朋友给些意见,谢谢!!!
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qgaoamtf

至尊木虫 (职业作家)


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前肽和成熟肽表达后需要进行切割分开通常是在细胞外培养液中的金属蛋白酶进行的,
2楼2009-07-06 21:45:49
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zplipeng

金虫 (著名写手)


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前肽有什么用处啊,到底
加油哦↖(^ω^)↗,O(∩_∩)O哈哈~
3楼2009-07-06 21:49:35
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由,人权之基。

优秀版主


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前肽似乎可以促进表达吧 又叫导肽
我们实验室里载体上的前肽就是促进蛋白表达的
表达的蛋白含有导肽 需要体外酶切
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
4楼2009-07-06 22:01:10
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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)

那这么说,我应该把前肽带上一起做克隆表达了?
然后在培养液中再酶切分开吗?
5楼2009-07-07 11:57:17
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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)

忘记说了,我做的是木瓜蛋白酶,呵呵
6楼2009-07-07 11:58:58
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由,人权之基。

优秀版主

对 应该是这样的
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
7楼2009-07-07 15:00:42
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charlies929

至尊木虫 (正式写手)


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你老板说的对,我们实验发现将前肽和成熟肽连在一起表达效果比单单成熟肽好很多
8楼2009-07-07 15:08:20
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

先做成熟肽,如果不行再加上前肽
9楼2009-07-07 15:23:43
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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)

我的目的基因结构是信号肽——前肽——成熟肽,我已经把前肽——成熟肽这个部分的PCR引物订出去了,没错吧?呵呵
10楼2009-07-07 18:55:14
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