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连若溪

新虫 (初入文坛)

[交流] 液质联用面积归一化法计算杂质含量的困惑 已有1人参与

寡核苷酸类样品,采用面积归一化法计算样品中的特定杂质的相对含量。因主成分内包裹杂质,液相色谱分不开,故采用液相质谱联用的方式来检测杂质含量。质谱仅是一级MS,软件计算出各组分的分子量和质谱强度(质谱强度相当于峰面积的意思),采用面积归一化法计算杂质含量。问题是,根据分子量能确定我们要的杂质a,b,c,d,e,f和主成分,但是同时还存在其他很多分子量,我们只能推算是主成分加和金属离子,主成分加和某溶剂,杂质a加和金属离子,杂质b加和某溶剂等等和噪音(根据分子量硬凑)。面积归一化法计算时是否要把这些所谓的加和峰参与计算,杂质a的含量是否要把杂质a加和金属离子或加和某溶剂的量加上去?关于这种算法的问题,目前还没有查到资料解决。

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晓月091999

金虫 (正式写手)

★
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讲真的,你这种计算方法不太严谨吧。。理由如下:

1.质谱的归一化法真的好奇怪,没见过用质谱计算归一化的,因为每个化合物的电离效率都不一样,响应也不是有比例关系的。
2.质谱图里面,软件计算的分子式都是估算的,准确率很低,你并不能完全确认出峰的就是这个你要的物质,更何况,只有一级谱图,更不能定性了。
3.质谱图里面你不能确定的物质,很有可能是背景干扰,比如溶剂里面的,我们用的甲醇乙腈经常会有一些背景,另外,空气里面也会有塑化剂在仪器里面有响应。那些其他的你不知道的,很可能就是这些,建议你做一下空白扣除。

以上
2楼2020-04-14 14:30:47
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