24小时热门版块排行榜    

查看: 1237  |  回复: 12

真好呀ya

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by biosci at 2020-04-07 21:33:07
都不如质谱最准确。
...

我们没用质谱

发自小木虫Android客户端
11楼2020-04-07 21:39:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
在蛋白异源表达的实验中,将目的蛋白基因克隆至载体,构建好的就是重组载体,转化至宿主细胞进行目的蛋白表达,获得的高量表达蛋白就是重组蛋白。这里需要注意的是,有些重组载体构建时,会带有相应蛋白标签,多用于目的蛋白的分离纯化,这时候携带标签的蛋白  
通常叫做融合蛋白(比如GST-目的蛋白,His-目的蛋白等),当蛋白标签GST、His被切除后,获得的蛋白才是你的目的蛋白。
  当然,目的蛋白的定义是相对的,其实还是根据你实验的目的来确定的,他并不是一个通用特定的名字,比如你进行蛋白表达目的是为了获得与原始氨基酸序列一致的蛋白,那么你的目的蛋白就是这个分子量的大小的蛋白,如果你的实验目的是为了获得一个携带标签的融合蛋白,那么在这个实验里,融合蛋白就是你的目的蛋白。
  如果是简单的蛋白克隆异源表达,通过page胶基本就可以确定目标蛋白分子量位置是否有表达(这里要注意你的载体构建时是否携带标签,如果携带,那么PAGE胶中就要考虑到标签的分子量)。当然如果是抗体类的产品,可能需要更加严格的实验来判断分子量的准确性。
   祝好
天空才是极限,我有信心飞的更高!
12楼2020-04-08 11:48:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

真好呀ya

新虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 原海亮 at 2020-04-08 11:48:14
在蛋白异源表达的实验中,将目的蛋白基因克隆至载体,构建好的就是重组载体,转化至宿主细胞进行目的蛋白表达,获得的高量表达蛋白就是重组蛋白。这里需要注意的是,有些重组载体构建时,会带有相应蛋白标签,多用于 ...

好的好的感谢解惑,蟹蟹啦

发自小木虫Android客户端
13楼2020-04-08 14:42:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 真好呀ya 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专业求调剂 +7 hanamiko 2026-03-18 7/350 2026-03-23 20:50 by baobaoye
[考研] 材料292调剂 +3 橘颂思美人 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:36 by pswait
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪!?!
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +8 tcxiaoxx 2026-03-20 9/450 2026-03-23 12:16 by tcxiaoxx
[考研] 085600材料与化工 +10 安全上岸! 2026-03-16 10/500 2026-03-23 09:31 by Jy?
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 354求调剂 +7 Tyoumou 2026-03-18 10/500 2026-03-22 11:11 by 人来盛
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +11 吃吃吃才有意义 2026-03-19 11/550 2026-03-21 18:23 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
信息提示
请填处理意见