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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » （求助）是否能用Sephadex LH-20分离吡啶类化合物？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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anotherone

金虫 (小有名气)

[交流] （求助）是否能用Sephadex LH-20分离吡啶类化合物？

现在出来的实验产物中含有2-氯-5-甲基吡啶及其同分异构体2-氯-3-甲基吡啶（M=127.5），用普通的硅胶柱无法分离。
请问，是否可以用Sephadex LH-20来分离？
若可以的话，用什么洗脱剂较为合适？
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1楼 2009-07-02 15:25:58
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vigor0325

金虫 (正式写手)
★ ★
anotherone(金币+1):谢谢参与
anotherone(金币+1,VIP+0):谢谢！ 7-8 08:48
恐怕不行。Sephadex主要按照分子量大小分离，操作不太容易，倒可以用反相柱层析分离。
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2楼2009-07-02 16:20:31
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pony3598

木虫 (正式写手)
★ ★
anotherone(金币+1):谢谢参与
anotherone(金币+1,VIP+0):谢谢！ 7-8 08:48
Sephadex LH-20是凝胶材料
分离的原理是分子筛，对于分子量大小相差较大的几种物质能有良好的分离效果，如果你的东西是分子量接近的话可能不行
试试看啊~
可以用甲醇做洗脱条件
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3楼2009-07-02 21:47:55
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初雪的寂寞

木虫 (著名写手)
★ ★
anotherone(金币+1):谢谢参与
anotherone(金币+1,VIP+0):谢谢！ 7-8 08:48
百度的，希望能对你有帮助

Sephadex LH20使用心得谈：

1 Sephadex LH20是一种价钱较高的填料，使用请千万注意，很贵的哟！（当然，老板有钱就另当别论拉）

2 先讲Sephadex LH20 的原理。 Sephadex LH20的分离原理主要有两方面：以凝胶过滤作用为主，兼具反相分配的作用（在反相溶剂中）。因为凝胶过滤作用，所以大分子的化合物保留弱，先被洗脱下来，小分子的化合物保留强，最后出柱。如果使用反相溶剂洗脱， Sephadex LH20对化合物还起反相分配的作用，所以极性大的化合物保留弱，先被洗脱下来，极性小的化合物保留强，后出柱。如果使用正相溶剂洗脱，这主要靠凝胶过滤作用来分离。

3 再讲Sephadex LH20 洗脱溶剂。听我讲完 第2点后，其实就应该清楚Sephadex LH20 洗脱溶剂因分为两类：反相和正相两种。用得最多的是反相溶剂洗脱，以甲醇－－水系统最为常见，先用水，逐渐增加甲醇比例，最后用100％甲醇冲柱。正相系统以氯仿－－甲醇最为常见，先用50％氯仿－－甲醇，逐渐增加甲醇比例，最后用100％甲醇冲柱。

4 接下来讲样品的处理和洗脱溶剂的选择。如果样品极性大，这选用反相溶剂洗脱（甲醇－－水），样品用最少体积的甲醇－－水（尽可能甲醇少一些）溶解，过滤后，湿法上样（一定要滤喔！要是把Sephadex LH20 堵啦，就得将Sephadex LH20 的柱头部分弃去，很心痛呀）。如果样品极性小，这选用正相溶剂洗脱（氯仿－－甲醇），样品用最少体积的氯仿－－甲醇溶解，过滤后，湿法上样。
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4楼2009-07-02 22:25:43
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无双国士

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
anotherone(金币+1):谢谢参与
anotherone(金币+1,VIP+0):谢谢！ 7-8 08:48
凝胶柱主要分离大分子量的物质（如蛋白质，聚合物）等等。

恐怕不适合分离楼主说说到的化合物。
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拔毛的凤凰真的不如个鸡吧？
5楼2009-07-02 23:24:21
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zww984716

金虫 (小有名气)

汉唐司令
★ ★
anotherone(金币+1):谢谢参与
anotherone(金币+1,VIP+0):谢谢！ 7-8 08:48
Sephadex LH20 的原理。 Sephadex LH20的分离原理主要有两方面：以凝胶过滤作用为主，兼具反相分配的作用（在反相溶剂中）。因为凝胶过滤作用，所以大分子的化合物保留弱，先被洗脱下来，小分子的化合物保留强，最后出柱。如果使用反相溶剂洗脱， Sephadex LH20对化合物还起反相分配的作用，所以极性大的化合物保留弱，先被洗脱下来，极性小的化合物保留强，后出柱。如果使用正相溶剂洗脱，这主要靠凝胶过滤作用来分离。
吡啶极性比较大，估计不好分
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像一杯酒，像一首老歌。。。吃着火锅，唱着老歌。。。
6楼2009-07-03 10:35:48
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sduwow

银虫 (小有名气)
★ ★
anotherone(金币+1):谢谢参与
anotherone(金币+1,VIP+0):谢谢！ 7-8 08:49
这个不行。貌似只能分出大分子的物质
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7楼2009-07-03 11:05:20
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anotherone

金虫 (小有名气)
谢谢以上各位的回答！
因为这两者性质实在相近，分离很困难，就想着能否从分子构型上入手。
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8楼2009-07-03 11:34:22
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oYo

木虫 (著名写手)
★ ★
anotherone(金币+1):谢谢参与
anotherone(金币+1,VIP+0):谢谢！ 7-8 08:49
根据原理是不行的
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9楼2009-07-03 16:08:02
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pony3598

木虫 (正式写手)
★
anotherone(金币+1,VIP+0):谢谢！ 7-8 08:49
应该不行的，同分异构体分子量一样，分子筛的作用就没有了
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10楼2009-07-04 10:00:32
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