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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 电泳图求解
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wjw992008

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
难道各位都没有用过这种上面亮下面暗的marker么？
楼主的marker像极了λ-HindIII digest，此类marker是对λ噬菌体DNA用HindIII直接酶切而制备的，从下到下共有八条带分别是23K、9K、6K、4K、2.4K、2.3K、500bp、150bp。由于是直接酶切没有经过条带调整各条带的摩尔数都是一样的，所以分子量大的条带在染色过程中由于插入的EB量最多所以显得更亮。一般这种marker上5ul 150bp的条带是基本看不见的。这类Marker还有一个特点就是4K的条带由于与23k条带发生COS末端结合，所以4K的条带反而比2K的要淡很多。
其它marker由于经过条带调整所以各条带亮度差不多。
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21楼2009-07-01 19:05:42
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lirongrong

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1.每次我跑的λ hindⅢ maker的时候，有七条带出现，a:23.13kb，b:9.42kb，c:6.56kb，d:4.36kb，e:2.32kb，f:2.02kb，g:0.56kb。最后一条g离倒数第二条f的距离要远于d和e之间的距离，而你跑的带最后两条带之间的距离很近，而恰恰最后一条带与样品大小相同，希望检查一下是不是样品和marker加到了一起。
2.最好知道这个质粒的大小，以验证是不是那个质粒
3.如果只切割了一个位点，质粒DNA成线性，那就只有一条带。如果没切割，那就应该因为质粒的特性，超螺旋，闭合环状，缺刻状态都有，且电泳移动速度不同，而有三条带。如果两个酶切割，有两条带。
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小木虫论坛-学习生活乐园
22楼2009-07-01 20:38:04
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piaofei3711292

木虫 (职业作家)

快乐家族-红蜻蜓
引用回帖:
Originally posted by wjw992008 at 2009-7-1 19:05:
难道各位都没有用过这种上面亮下面暗的marker么？
楼主的marker像极了λ-HindIII digest，此类marker是对λ噬菌体DNA用HindIII直接酶切而制备的，从下到下共有八条带分别是23K、9K、6K、4K、2.4K、2.3K、500bp、 ...

多谢指点，深刻学习了不少知识。
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如果命运抓住了?玫暮砹�?镁湍用说母熘�
23楼2009-07-03 14:05:44
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piaofei3711292

木虫 (职业作家)

快乐家族-红蜻蜓
引用回帖:
Originally posted by lirongrong at 2009-7-1 20:38:
1.每次我跑的λ hindⅢ maker的时候，有七条带出现，a:23.13kb，b:9.42kb，c:6.56kb，d:4.36kb，e:2.32kb，f:2.02kb，g:0.56kb。最后一条g离倒数第二条f的距离要远于d和e之间的距离，而你跑的带最后两条带之间的距 ...

谢谢你，我会好好检查一下的。
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如果命运抓住了?玫暮砹�?镁湍用说母熘�
24楼2009-07-03 14:06:15
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白建芳

铜虫 (初入文坛)
你的marker太大了吧
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25楼2009-07-04 10:40:46
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