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wjw992008

银虫 (小有名气)

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
难道各位都没有用过这种上面亮下面暗的marker么?
楼主的marker像极了λ-HindIII digest,此类marker是对λ噬菌体DNA用HindIII直接酶切而制备的,从下到下共有八条带分别是23K、9K、6K、4K、2.4K、2.3K、500bp、150bp。由于是直接酶切没有经过条带调整各条带的摩尔数都是一样的,所以分子量大的条带在染色过程中由于插入的EB量最多所以显得更亮。一般这种marker上5ul 150bp的条带是基本看不见的。这类Marker还有一个特点就是4K的条带由于与23k条带发生COS末端结合,所以4K的条带反而比2K的要淡很多。
其它marker由于经过条带调整所以各条带亮度差不多。
21楼2009-07-01 19:05:42
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lirongrong

银虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1.每次我跑的λ hindⅢ maker的时候,有七条带出现,a:23.13kb,b:9.42kb,c:6.56kb,d:4.36kb,e:2.32kb,f:2.02kb,g:0.56kb。最后一条g离倒数第二条f的距离要远于d和e之间的距离,而你跑的带最后两条带之间的距离很近,而恰恰最后一条带与样品大小相同,希望检查一下是不是样品和marker加到了一起。
2.最好知道这个质粒的大小,以验证是不是那个质粒
3.如果只切割了一个位点,质粒DNA成线性,那就只有一条带。如果没切割,那就应该因为质粒的特性,超螺旋,闭合环状,缺刻状态都有,且电泳移动速度不同,而有三条带。如果两个酶切割,有两条带。
小木虫论坛-学习生活乐园
22楼2009-07-01 20:38:04
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piaofei3711292

木虫 (职业作家)

快乐家族-红蜻蜓

引用回帖:
Originally posted by wjw992008 at 2009-7-1 19:05:
难道各位都没有用过这种上面亮下面暗的marker么?
楼主的marker像极了λ-HindIII digest,此类marker是对λ噬菌体DNA用HindIII直接酶切而制备的,从下到下共有八条带分别是23K、9K、6K、4K、2.4K、2.3K、500bp、 ...

多谢指点,深刻学习了不少知识。
如果命运抓住了?玫暮砹�?镁湍用说母熘�
23楼2009-07-03 14:05:44
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piaofei3711292

木虫 (职业作家)

快乐家族-红蜻蜓

引用回帖:
Originally posted by lirongrong at 2009-7-1 20:38:
1.每次我跑的λ hindⅢ maker的时候,有七条带出现,a:23.13kb,b:9.42kb,c:6.56kb,d:4.36kb,e:2.32kb,f:2.02kb,g:0.56kb。最后一条g离倒数第二条f的距离要远于d和e之间的距离,而你跑的带最后两条带之间的距 ...

谢谢你,我会好好检查一下的。
如果命运抓住了?玫暮砹�?镁湍用说母熘�
24楼2009-07-03 14:06:15
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白建芳

铜虫 (初入文坛)

你的marker太大了吧
25楼2009-07-04 10:40:46
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