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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何克隆质粒上抗性片段
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yghboy168

银虫 (小有名气)

[交流] 如何克隆质粒上抗性片段

如何克隆质粒上抗性片段，主要如何找抗性片段的启动子？
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眼内有尘三界窄，心头无事一床宽！
1楼 2009-06-30 10:05:53
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zfszheng

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
知道抗性片段的话 可以直接设计引物扩出来
也可以用酶直接切下来
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2楼2009-06-30 10:35:16
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w.king124

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
建议设计特异性引物直接克隆，得量比较大，一般加在某个启动子的后面都可以表达 的
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3楼2009-06-30 14:26:19
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playboy723

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
摇质粒后直接抽提酶切不就得了   不难的
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4楼2009-06-30 14:29:42
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yanlili

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
先查出抗性基因的序列，设计引物（带有酶切位点），pcr之后，酶切连接到表达载体上，用表达载体的启动子就行了吧，注意读码框
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5楼2009-06-30 14:29:43
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dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
到ncbi上找质粒，有详细的说明，包括抗性基因及启动子位置
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6楼2009-06-30 14:37:53
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