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yghboy168

银虫 (小有名气)

[交流] 如何克隆质粒上抗性片段

如何克隆质粒上抗性片段,主要如何找抗性片段的启动子?
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眼内有尘三界窄,心头无事一床宽!
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zfszheng

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
知道抗性片段的话 可以直接设计引物扩出来
也可以用酶直接切下来
2楼2009-06-30 10:35:16
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w.king124

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议设计特异性引物直接克隆,得量比较大,一般加在某个启动子的后面都可以表达 的
3楼2009-06-30 14:26:19
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playboy723

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
摇质粒后直接抽提酶切不就得了   不难的
4楼2009-06-30 14:29:42
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yanlili

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
先查出抗性基因的序列,设计引物(带有酶切位点),pcr之后,酶切连接到表达载体上,用表达载体的启动子就行了吧,注意读码框
5楼2009-06-30 14:29:43
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dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
到ncbi上找质粒,有详细的说明,包括抗性基因及启动子位置
6楼2009-06-30 14:37:53
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