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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 融合蛋白选择
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小野说

新虫 (初入文坛)

[求助] 融合蛋白选择 已有1人参与

各位大神，现在准备做一个含有融合蛋白的包涵体，菌株为pET-28a（+），目的蛋白分子量~3KDa，现在想从大肠杆菌本身内源蛋白中做出选择，作为标签表达融合蛋白，想知道BL21(DE3)菌体本身含有的内源性蛋白含量最高的是什么蛋白？欢迎提供蛋白名称或者查阅相应的方法和文献。
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1楼 2020-02-19 23:18:14
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童话zhl

新虫 (小有名气)
你好，想请教一下，关于pET28a载体插入的目的片段有方向要求么？

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3楼2020-03-25 22:14:43
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ECUST_CAPF

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2020-03-11 08:07:54
Trigger Factor(TF)   gene name：tig ，你可以在NCBI，ecogene，ecocyc等几个网站找到详细信息，这个标签很猛，基本是目前E.coli里作为融合标签増溶性最强之一，不过是胞内表达，考虑一下
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Behind the glory is a loneliness
2楼2020-03-09 11:42:15
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小野说

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ECUST_CAPF at 2020-03-09 11:42:15
Trigger Factor(TF)   gene name：tig ，你可以在NCBI，ecogene，ecocyc等几个网站找到详细信息，这个标签很猛，基本是目前E.coli里作为融合标签増溶性最强之一，不过是胞内表达，考虑一下

谢谢，这个标签是厉害，可他的有432aa，有点太大了。还有其他小一点的吗？或者疏水性更强些的。
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4楼2020-04-09 14:16:14
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小野说

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 童话zhl at 2020-03-25 22:14:43
你好，想请教一下，关于pET28a载体插入的目的片段有方向要求么？

按照质粒图谱下方的相关酶切位点的方向就OK。
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5楼2020-04-09 14:17:29
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