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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 超滤能分离得开5KD和15KD的蛋白?
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CY907

至尊木虫 (初入文坛)

[交流] 超滤能分离得开5KD和15KD的蛋白?

我的目的蛋白是5KD,杂志蛋白是20KD,15KD,分子量差别不大,我不知道可不可以用超滤进行分离,且不知道这种方法适合不适合大规模生产,请专家们给予指导,谢谢!
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努力过好每一天！
1楼 2009-06-28 15:06:30
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匿名

用户注销 (小有名气)
★
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2楼2009-06-29 11:16:32
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lifeip

至尊木虫 (知名作家)
★
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理论上可以超滤，但缺少合适商业化滤膜。一般商业化滤膜孔径是1，3，5，10，15---------。
不能滤过的超滤膜孔径的选择一般是小于目标蛋白分子量的1/3，即30kDa目标蛋白，一般选用10kDa的膜阻虑，这是在不知蛋白结构情况下的粗略推算。如果明确蛋白结构是球形或线性后，则好办些，10kDa膜一般阻虑30kda线性蛋白，10kDa球形蛋白。
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3楼2009-06-29 11:36:20
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★
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不好判断。

许多超滤膜参数说可以，那是他们自吹的。

如果只有这3中蛋白，建议离子交换吧。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2009-06-29 12:40:46
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)
实际上，是分不开的。
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5楼2009-06-29 14:26:14
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piaoyoufeng

★
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每个厂家对超滤膜（包）的截留分子量（MWCO）的定义是不一样的，而且不清楚你的蛋白空间构型，所以最好试验下才能定论。你可以选择截留分子量为5000的超滤膜进行试验，收集透过液即你的目的蛋白，杂质因分子量太大而被截留，从而得以分离。
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6楼2009-07-23 11:04:49
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ly888lsp

木虫 (小有名气)
★
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大规模做的话我没经验 也许用高通量的c4c8反向柱就可以了
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7楼2009-07-23 14:50:01
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yxdjackson

银虫 (小有名气)
呵呵
用超滤有难度的吧
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研发 研发 研个大沙发 哈哈
8楼2009-07-25 05:40:21
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peizhilee

金虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
Originally posted by piaoyoufeng at 2009-7-23 11:04:
每个厂家对超滤膜（包）的截留分子量（MWCO）的定义是不一样的，而且不清楚你的蛋白空间构型，所以最好试验下才能定论。你可以选择截留分子量为5000的超滤膜进行试验，收集透过液即你的目的蛋白，杂质因分子量太大 ...

选择截留分子量为5000的超滤膜恐怕不行吧，这个截留分子量只是大致的范围，
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一念成魔，一念成佛
9楼2009-07-25 10:12:37
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