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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DNA测序的问题！
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hj122

金虫 (小有名气)

[交流] DNA测序的问题！

有一段未知序列的DNA样品想要测序，但是打电话给生工说要先PCR，可是不知道序列不能设计引物，怎么P呢？请教做过测序的虫子们！

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-5 at 21:07 ]
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1楼 2009-06-27 21:03:10
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
没有引物怎么测序呢？？？确实是啊，没有引物是测不了序列的。
你的这段序列是怎么得到的pcr？还是酶切？还是胶回收？
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会当凌绝顶，一览众山小
2楼2009-06-27 21:12:41
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不知道序列是怎么来的？如果是纯化后的DNA的话，可以连T，提质粒跑电泳，大致选择阳性克隆（阳性克隆比自连跑得慢），就可以送去测序了，引物用T载通用引物。
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Thank-you，so-blue.
3楼2009-06-27 21:29:00
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aaaaaa1380

至尊木虫 (知名作家)
同意楼上观点
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4楼2009-06-27 21:50:22
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白建芳

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
华大可以用菌液测序，你可以试一试通用引物
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5楼2009-06-27 22:01:04
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zplipeng

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果您对此序列一无所知，是不可能得到他的啊。。。
即使只知道两端或一端得部分序列，也是可以p的，
或者知道蛋白序列。。。。
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加油哦↖(^ω^)↗，O(∩_∩)O哈哈~
6楼2009-06-28 13:24:15
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hj122

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sutao1979 at 2009-6-27 21:12:
没有引物怎么测序呢？？？确实是啊，没有引物是测不了序列的。
你的这段序列是怎么得到的pcr？还是酶切？还是胶回收？

还没有P,没办法设计引物所以还没有P
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7楼2009-06-28 14:34:58
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wangtengxu

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
序列是未知的
但是你连的载体的序列是已知的
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想和有趣的人一起做有趣的事。
8楼2009-06-28 14:56:06
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j2

木虫 (正式写手)
细菌的通用引物试试？
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
9楼2009-06-28 16:55:29
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lxh9217

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
转大肠杆菌,设计载体,如,PUC18等,用M13作引物.
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10楼2009-07-02 11:59:08
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