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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 农林综合 » 【求助】黄栌叶片诱导愈伤组织（叶片背面及边缘变黑）怎么办？
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baoshaowen

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】黄栌叶片诱导愈伤组织（叶片背面及边缘变黑）怎么办？

小弟，最近做黄栌的组培试验，用MS培养基+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，激素为6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L，来诱导愈伤组织（比例为相关文献查得）
利用黄栌的幼叶作为外植体，常规灭菌方法

在培养的前3-5天叶片正常，为防止褐化加入1.5mg/L的Vc，并且3-5天转移一次。
每次都是在5天左右开始，叶片底部产生黑色的小点，然后整个叶片皱缩，转移到新的培养基上情况也不会缓解，最后整个叶片背面变黑，死亡。

实在不理解是为什么，请高手解答
还有就是有没有什么地方有黄栌的组培苗卖。。。想利愈伤组织，或者组培小苗做接种某个病菌，然后测定不同时间酶及蛋白的活性等
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1楼 2009-06-26 10:34:17
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胡一胡

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
为什么加那么高的激动素？是自己想的嘛？一般愈伤诱导可以用2，4-D
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2楼2009-06-28 07:28:41
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hzau_hb

金虫 (小有名气)
加点硝酸银试试看
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不断学习....不断反思....
3楼2009-06-29 15:22:53
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baoshaowen

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 胡一胡 at 2009-6-28 07:28:
为什么加那么高的激动素？是自己想的嘛？一般愈伤诱导可以用2，4-D

文献上写的，查过10几个文献，大概都是这个浓度左右的。
实在不行我就试试24D
还有其他方面的看法么？
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4楼2009-06-30 18:26:39
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baoshaowen

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by hzau_hb at 2009-6-29 15:22:
加点硝酸银试试看

加硝酸银？？没见过有加这个的啊
有什么作用啊？
赞一下 回复此楼
5楼2009-06-30 18:27:28
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gskekeai

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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wenzhenzhong(金币+2,VIP+0):感谢讨论 11-22 21:24
可不可以试一下用幼茎获得组培苗？？即那个叶片换成幼茎进行组培。
文献上查下的激素浓度，我的看法是你最好还是自己设一些梯度摸索一下，一般都不好直接用，尤其是国内的文献。你可以以他的为基础上下浮动一下。
看样子你的叶片变黑应该不是消毒的问题，试一下激素浓度吧。
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6楼2009-08-25 16:03:35
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景魏晋

铁杆木虫 (知名作家)
★ ★ ★
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wenzhenzhong(金币+2,VIP+0):感谢讨论 11-22 21:24
取材之前先暗培养一段时间，这样有助于减轻外植体褐化
赞一下(11人) 回复此楼
努力
7楼2009-11-22 11:30:32
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