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baoshaowen

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】黄栌叶片诱导愈伤组织(叶片背面及边缘变黑)怎么办?

小弟,最近做黄栌的组培试验,用MS培养基+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,激素为6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L,来诱导愈伤组织(比例为相关文献查得)
利用黄栌的幼叶作为外植体,常规灭菌方法

在培养的前3-5天叶片正常,为防止褐化加入1.5mg/L的Vc,并且3-5天转移一次。
每次都是在5天左右开始,叶片底部产生黑色的小点,然后整个叶片皱缩,转移到新的培养基上情况也不会缓解,最后整个叶片背面变黑,死亡。

实在不理解是为什么,请高手解答
还有就是有没有什么地方有黄栌的组培苗卖。。。想利愈伤组织,或者组培小苗做接种某个病菌,然后测定不同时间酶及蛋白的活性等
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胡一胡

金虫 (小有名气)


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为什么加那么高的激动素?是自己想的嘛?一般愈伤诱导可以用2,4-D
2楼2009-06-28 07:28:41
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hzau_hb

金虫 (小有名气)

加点硝酸银试试看
不断学习....不断反思....
3楼2009-06-29 15:22:53
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baoshaowen

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 胡一胡 at 2009-6-28 07:28:
为什么加那么高的激动素?是自己想的嘛?一般愈伤诱导可以用2,4-D

文献上写的,查过10几个文献,大概都是这个浓度左右的。
实在不行我就试试24D
还有其他方面的看法么?
4楼2009-06-30 18:26:39
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baoshaowen

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by hzau_hb at 2009-6-29 15:22:
加点硝酸银试试看

加硝酸银??没见过有加这个的啊
有什么作用啊?
5楼2009-06-30 18:27:28
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gskekeai

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
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wenzhenzhong(金币+2,VIP+0):感谢讨论 11-22 21:24
可不可以试一下用幼茎获得组培苗??即那个叶片换成幼茎进行组培。
文献上查下的激素浓度,我的看法是你最好还是自己设一些梯度摸索一下,一般都不好直接用,尤其是国内的文献。你可以以他的为基础上下浮动一下。
看样子你的叶片变黑应该不是消毒的问题,试一下激素浓度吧。
6楼2009-08-25 16:03:35
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景魏晋

铁杆木虫 (知名作家)

★ ★ ★
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wenzhenzhong(金币+2,VIP+0):感谢讨论 11-22 21:24
取材之前先暗培养一段时间,这样有助于减轻外植体褐化
努力
7楼2009-11-22 11:30:32
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