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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » western一抗过夜，膜干了，怎么办？
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gwen6356

铁虫 (小有名气)

[交流] western一抗过夜，膜干了，怎么办？

western一抗过夜，膜干了，怎么办？
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1楼 2009-06-22 10:56:10
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mourning

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0):good idea！ 6-22 12:58
就是要防止干，干了就没用了
你可用一盒子或培养皿，放几块湿滤纸，用石蜡纸包裹载玻片，膜可正置于玻片上滴加抗体或将抗体滴在玻片上再倒扣膜其上，盖上盖子保持湿润，不推荐过夜4度，室温1-2小时即可

[ Last edited by mourning on 2009-6-22 at 11:16 ]
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2楼2009-06-22 11:08:07
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hu6704526

银虫 (小有名气)
重新做一遍就是了
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3楼2009-06-22 13:34:16
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playboy723

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
应该还能用  但是处理时要费事一点儿
先用TBST洗几次  把残余的一抗洗下去    膜用甲醇再浸泡几分钟  之后再洗几次 应该就能二抗继续了   如果结果不好的话就重新一遍一抗二抗就行   膜是可以继续用的
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4楼2009-06-22 15:16:36
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ytetyio09

新虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
wash with PBST, THEN block, and add the second antibody.
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5楼2009-06-22 15:22:44
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lujun01

银虫 (小有名气)
多次洗
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6楼2009-06-22 15:46:52
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zswx1

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
重做一遍喽~一般一抗不用过夜的，1~2h 37°就好
你不会过夜也是37°吧？
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7楼2009-06-22 16:17:57
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gwen6356

铁虫 (小有名气)
谢谢各位！我是四度过夜，没有37度两小时过
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8楼2009-06-22 18:21:30
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
干了的话，最好的办法就是扔掉了，否则做出的结果背景会很可怕的......要是觉得可惜可以用TBST洗一段时间，然后用stripe buffer 消化一下蛋白，可能会起点作用，但是，也不好说，没试过你这种情况
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会当凌绝顶，一览众山小
9楼2009-06-22 23:47:12
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