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shuixinshi

银虫 (小有名气)

[交流] 膜蛋白鉴定技术

本人做膜白质提取鉴定工作,膜蛋白本身的性质决定了要使用表面活性剂来溶解。本人想对提取的蛋白质做质谱分析,询问过一些研究机构和公司,都要求把表面活性剂去掉,还要脱盐。本人是半路出家,那位懂行的能指教一下,提供点资料。

[ Last edited by amisking on 2009-6-27 at 20:16 ]
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HarveyWang

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海外行者


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引用回帖:
Originally posted by liguanjun at 2009-6-27 10:51:
这位大哥,小弟现在做的东西,我证明一个蛋白是在菌体上的,我想拿到这个蛋白。看大哥做的膜蛋白提取,想着对小弟会很有帮助。能否指点一下,指点一下您的提取方法。将不胜感激!1

不同菌株的膜蛋白提取有比较大的差别,我做的是大肠杆菌的,很容易。

做某些厚壁的致病菌的膜蛋白提取时很不容易啊。

你做什么菌株啊?那样我才能有针对性地再告诉你。

大肠杆菌的膜蛋白提取可参考下面文献。

Proteomic analysis of the Escherichia coli outer membrane
European Journal of Biochemistry
2001,267:2871 - 2881


Time-Dependent Proteome Alterations under Osmotic Stress during Aerobic and Anaerobic Growth in Escherichia coli
Journal of Bacteriology, 2006,188:7165-7175
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2009-06-27 11:17:22
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

Membrane Proteomics - Methods and Protocols

Namipan download link:
http://d.namipan.com/d/0acefc9a5 ... 673f61742533a3b3c00
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2009-06-27 10:47:38
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liguanjun

银虫 (小有名气)


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这位大哥,小弟现在做的东西,我证明一个蛋白是在菌体上的,我想拿到这个蛋白。看大哥做的膜蛋白提取,想着对小弟会很有帮助。能否指点一下,指点一下您的提取方法。将不胜感激!1
3楼2009-06-27 10:51:18
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liguanjun

银虫 (小有名气)


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引用回帖:
Originally posted by HarveyWang at 2009-6-27 11:17:




不同菌株的膜蛋白提取有比较大的差别,我做的是大肠杆菌的,很容易。

做某些厚壁的致病菌的膜蛋白提取时很不容易啊。

你做什么菌株啊?那样我才能有针对性地再告诉你。

大肠杆菌的膜蛋白提取可参 ...

芽孢杆菌,革兰氏阳性菌,望不吝赐教!谢谢!
5楼2009-06-27 19:28:51
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