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汪汪秀

金虫 (正式写手)

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[交流] SOS质粒电泳跑成这个样子？？？？？？

大肠杆菌DH5α质粒有6条带。。。
奇怪
方法是碱裂解法
加SOLUTION2时没有超过三分钟
也没有剧烈震荡
大家帮我解决一下啊。。。。

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返璞归真

1楼 2009-06-19 15:22:22

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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由，人权之基。

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★
汪汪秀(金币+1,VIP+0): 6-19 15:59

前面的四条小带很诡异！RNA也够亮的

是不是菌液不纯啊有多种质粒？

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从小就学习鲁迅，直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助，却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊！

2楼2009-06-19 15:41:17

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dsslnn

铜虫 (初入文坛)

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汪汪秀(金币+1,VIP+0): 6-19 15:59

先证明是不是一个质粒，选择在这个质粒上有一个位点的内切酶，单切一下，看最后是不是一条带，就能证明是不是一个质粒了啊！
如果证明是一个质粒，那么6条带，可能包括双螺旋，开环，线性，还有就是复制中的质粒，还没有分开就被你提出来了（个人觉得如果是一个质粒的话，只能这么解释）。

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3楼2009-06-19 15:45:19

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dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)

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★
汪汪秀(金币+1,VIP+0): 6-19 15:59

跑电泳时点一个lambdaDNA-HindIII酶切产物做marker。用单酶切点酶切一下，就知道是不是目的质粒了。最下边可能是rna。我建议你用试剂盒提，就不会这么麻烦了。

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4楼2009-06-19 15:53:30

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汪汪秀

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引用回帖:

Originally posted by 汪汪秀 at 2009-6-19 15:22:
大肠杆菌DH5α质粒有6条带。。。
奇怪
方法是碱裂解法
加SOLUTION2时没有超过三分钟
也没有剧烈震荡
大家帮我解决一下啊。。。。

RNA酶37°温浴半个小时了
不是RNA
我感觉如果只是出现前面三条带那就正确了

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返璞归真

5楼2009-06-19 15:55:08

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汪汪秀

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但是如果用试剂盒提的话，没有那么多杂带

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返璞归真

6楼2009-06-19 15:56:46

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汪汪秀

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四条带可能的解释是什么呢？？

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返璞归真

7楼2009-06-19 15:59:14

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anik

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汪汪秀(金币+1,VIP+0): 6-20 22:09

RNaseA没有消化好。下面亮的条带都是RNA

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8楼2009-06-19 18:15:58

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汪汪秀

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Originally posted by 汪汪秀 at 2009-6-19 15:59:

四条带可能的解释是什么呢？？

那么点样空附近的带又怎么解释呢？？？

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返璞归真

9楼2009-06-20 22:10:31

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林祎

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RNA酶没有处理好吧

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10楼2009-06-21 00:04:58

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