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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SOS质粒电泳跑成这个样子？？？？？？
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汪汪秀

金虫 (正式写手)

[交流] SOS质粒电泳跑成这个样子？？？？？？

大肠杆菌DH5α质粒有6条带。。。
奇怪
方法是碱裂解法
加SOLUTION2时没有超过三分钟
也没有剧烈震荡
大家帮我解决一下啊。。。。
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返璞归真
1楼 2009-06-19 15:22:22
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由，人权之基。

优秀版主
★
汪汪秀(金币+1,VIP+0): 6-19 15:59
前面的四条小带很诡异！RNA也够亮的
是不是菌液不纯啊 有多种质粒？
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从小就学习鲁迅，直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助，却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊！
2楼2009-06-19 15:41:17
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dsslnn

铜虫 (初入文坛)
★
汪汪秀(金币+1,VIP+0): 6-19 15:59
先证明是不是一个质粒，选择在这个质粒上有一个位点的内切酶，单切一下，看最后是不是一条带，就能证明是不是一个质粒了啊！
如果证明是一个质粒，那么6条带，可能包括双螺旋，开环，线性，还有就是复制中的质粒，还没有分开就被你提出来了（个人觉得如果是一个质粒的话，只能这么解释）。
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3楼2009-06-19 15:45:19
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dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)
★
汪汪秀(金币+1,VIP+0): 6-19 15:59
跑电泳时点一个lambdaDNA-HindIII酶切产物做marker。用单酶切点酶切一下，就知道是不是目的质粒了。最下边可能是rna。我建议你用试剂盒提，就不会这么麻烦了。
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4楼2009-06-19 15:53:30
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汪汪秀

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 汪汪秀 at 2009-6-19 15:22:
大肠杆菌DH5α质粒有6条带。。。
奇怪
方法是碱裂解法
加SOLUTION2时没有超过三分钟
也没有剧烈震荡
大家帮我解决一下啊。。。。

RNA酶37°温浴半个小时了
不是RNA
我感觉如果只是出现前面三条带那就正确了
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返璞归真
5楼2009-06-19 15:55:08
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汪汪秀

金虫 (正式写手)
但是如果用试剂盒提的话，没有那么多杂带
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返璞归真
6楼2009-06-19 15:56:46
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汪汪秀

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 汪汪秀 at 2009-6-19 15:22:
大肠杆菌DH5α质粒有6条带。。。
奇怪
方法是碱裂解法
加SOLUTION2时没有超过三分钟
也没有剧烈震荡
大家帮我解决一下啊。。。。

四条带可能的解释是什么呢？？
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返璞归真
7楼2009-06-19 15:59:14
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anik

银虫 (正式写手)
★
汪汪秀(金币+1,VIP+0): 6-20 22:09
RNaseA没有消化好。下面亮的条带都是RNA
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8楼2009-06-19 18:15:58
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汪汪秀

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 汪汪秀 at 2009-6-19 15:59:

四条带可能的解释是什么呢？？

那么点样空附近的带又怎么解释呢？？？
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返璞归真
9楼2009-06-20 22:10:31
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林祎

木虫 (正式写手)
RNA酶没有处理好吧
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10楼2009-06-21 00:04:58
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