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yelinlin

木虫 (著名写手)

[交流] PCR扩增片段

分子生物学刚入门呢,有些问题请教大家啊?
相同的引物,不同的PCR扩增程序,是不是扩增出来的片段大小不一呀?
我后面是想做DGGE,扩出来的片段是170bp,是不是太小了啊,求助中

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-17 at 17:09 ]
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dongjiqiao

铁杆木虫 (著名写手)

延伸时间不一样扩出来的片段大小肯定不一样~~~估计你的这个片段有点小,扩出来检测是应该小心~~~
long,longlong.
2楼2009-06-18 13:37:13
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ilaveu

木虫 (著名写手)

★
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引用回帖:
Originally posted by dongjiqiao at 2009-6-18 13:37:
延伸时间不一样扩出来的片段大小肯定不一样~~~估计你的这个片段有点小,扩出来检测是应该小心~~~

引物一样的话,扩增大小与延伸时间没有关系吧?
3楼2009-06-18 13:52:03
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dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我认为,只要延伸时间别太短,应该没差别。1000bp有40s足够了
4楼2009-06-18 14:10:29
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beisimai895

木虫 (小有名气)

★
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怎么会扩增出不一样的片段呢?引物与模板结合的位置是一定的,这样的话,扩增出来的片段长度就是确定的,只不过你的延伸时间会影响你的实验结果,好与不好,不可能不一样的,那样的话还得了
5楼2009-06-18 15:58:44
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weilin2378

木虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
只要引物一样,扩增出的片段长度也一样。
DGGE不太清楚,但是文献中的扩增长度一般为200多bp.
6楼2009-06-18 20:34:52
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