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zhl406

金虫 (小有名气)

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[交流] 求助：高速逆流色谱中正反转的问题

我是刚刚开始用逆流色谱分离中药中的黄酮类化合物的，现在碰到一个问题，就是逆流色谱仪上有In与Out，也有正转和反转之分，我想问一下这四种方式结合起来用有什么要求？还有就是In与正转和Out与反转的效果是一样的吗？逆流中是不是一般都是用重相（下相）做流动相比较多呢？如果我用下相做固定相，上相做流动相，除了要降低流速，减小旋转速度之外还有什么需要注意的地方吗？谢谢各位的指教！

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艰难困苦玉汝于成

1楼 2009-06-17 16:34:59

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zhl406

金虫 (小有名气)

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我想问清楚下就是主机正反转到底有什么目的？是不是在IN的状态下正转和in的状态下反转会分别导致柱子的头和尾的顺序发生改变？就比如本来柱子的左边是头右边是尾部，反转之后就会变成左边是尾右边是头了吗？我是这么理解的，想请各位大侠指教一二，最近做实验很不顺利，用乙酸乙酯正丁醇水体系固定相老是保留不住，怀疑是正反转设置有问题，但是四种组合我都试过了，保留率都基本为零，各位大侠给支个招啊，我的化合物极性比较大，溶于水和甲醇，正丁醇中溶解度不是很好，这几天又试了乙酸乙酯乙酸和水的体系，理论上保留率是很好的书上说，我的只有30%左右的保留率，到底是怎么回事呢？