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gastrodia

金虫 (正式写手)

[交流] 帮忙看一下质粒电泳的图谱

质粒转化大肠杆菌180转/min培养10h(37度)后收集5ml菌液,使用天根的质粒小提试剂盒进行抽提,终洗脱体积为50微升,紫外检测,232.4ng/微升,电泳上样量为3微升,电泳条件:TAE电泳,电压180v,10min,电流200mA。

不好意思,忘了说质粒大小:6000bp

我看别人都说质粒电泳图谱为三条带,我这里好像不是啊

问题已解决,是上样量太大,看不出来,我在第二页贴了酶切之后的电泳图谱,已证实就是我所需要的质粒

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-17 at 17:08 ]
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gastrodia

金虫 (正式写手)

谢谢大家,我用fermentas 的酶快速切了5min,然后又跑了一张电泳,marker使用就是蓝布他HindIII,从大小上看就是需要的质粒,呵呵,最近是第一次做酶切和质粒抽提,心还是有点虚啊
13楼2009-06-17 20:36:51
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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你也不说你的质粒多大啊
帮助虫友,提升自己
2楼2009-06-17 13:58:22
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biogefart

木虫 (著名写手)

不一定一条带


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有时候两条,更多时候3条,一条的话说明你提的水平高
闹太套
3楼2009-06-17 14:00:04
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
试剂盒有时候会洗掉一些其他构象的
4楼2009-06-17 14:02:19
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