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iceneo1983

银虫 (小有名气)

[交流] 请问大家免疫沉淀的问题

请教大家一个问题,在做免疫沉淀时发现用抗体可以将克隆的蛋白沉淀下来,但是用同样的抗体,同样的条件去沉淀天然的蛋白时却没有任何条带,希望有经验的人能帮忙分析一下原因,是因为抗体的灵敏性太差吗?谢谢了。
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)

★ ★
iceneo1983(金币+1):谢谢参与
iceneo1983(金币+1,VIP+0): 6-17 13:14
你指的天然蛋白是全细胞裂解液么?如果是的话,蛋白丰度肯定没有克隆的高,可以提高细胞量和抗体量。
2楼2009-06-17 01:06:58
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seahow

木虫 (著名写手)


iceneo1983(金币+1):谢谢参与
请问楼主的蛋白以及抗体的加入量
3楼2009-06-17 07:05:06
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)


iceneo1983(金币+1):谢谢参与
你的抗体应该是用克隆表达的蛋白免疫动物获得的吧?如果是这个样子,有可能表达的蛋白和天然蛋白在结构上存在差异,导致与天然蛋白结合失效或者亲和力降低等现象。
52187644
4楼2009-06-17 13:06:05
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siyuansu

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
作免疫沉淀一定要确定量。
ooooooooooooooo!
5楼2009-08-27 21:23:44
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