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loveedward

银虫 (小有名气)

[交流] 请教酶活计算公式

小弟做的是NADPH依赖型羰基还原酶,该酶在还原底物的过程中消耗NADPH。我测酶活的时候是在A340nm处读到1min内的吸光度的降低的数值。反应总体系为250ul,包括20mmol/L磷酸缓冲液,底物终浓度1mmol,辅酶NADPH终浓度0.25mmol和适量酶液。具体反映为将缓冲液,底物和辅酶依次加入后30度保温2min,加入适量酶液后读取1min内的A340nm处的吸光值的下降。酶活定义:在上述条件下,每分钟催化氧化1μmol NADPH的酶活力为1个酶活单位。现在我想知道的是如何确定酶活计算公式以及公式中各部分的单位?
跪求!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
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司马诸葛

木虫 (正式写手)

路过,顶一下
2楼2009-06-16 10:06:07
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xiaohui123

铁虫 (初入文坛)

这是个问题
3楼2009-08-18 20:08:38
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comecome840813

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+4,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-22 13:25
活性测定方法:
浓度(U/L)=待测物吸光度△A×K

K= VT        *1000000/VS*ε*d

VT=反应液总体积(ul)
VS=样本体积(ul)
d=比色杯光径(cm)
ε=摩尔消光系数
注:NADPH的活力以国际单位表示,即1L样品中NADPH在37℃每分钟催化氧化1μmol NADPH的酶活力为1个酶活单位(U/L)
4楼2009-08-22 13:15:50
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