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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教酶活计算公式
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loveedward

银虫 (小有名气)

[交流] 请教酶活计算公式

小弟做的是NADPH依赖型羰基还原酶，该酶在还原底物的过程中消耗NADPH。我测酶活的时候是在A340nm处读到1min内的吸光度的降低的数值。反应总体系为250ul，包括20mmol/L磷酸缓冲液，底物终浓度1mmol，辅酶NADPH终浓度0.25mmol和适量酶液。具体反映为将缓冲液，底物和辅酶依次加入后30度保温2min，加入适量酶液后读取1min内的A340nm处的吸光值的下降。酶活定义：在上述条件下，每分钟催化氧化1μmol NADPH的酶活力为1个酶活单位。现在我想知道的是如何确定酶活计算公式以及公式中各部分的单位？
跪求！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！
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1楼 2009-06-16 08:55:07
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司马诸葛

木虫 (正式写手)
路过，顶一下
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2楼2009-06-16 10:06:07
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xiaohui123

铁虫 (初入文坛)
这是个问题
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3楼2009-08-18 20:08:38
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comecome840813

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+4,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-22 13:25
活性测定方法：
浓度（U/L）=待测物吸光度△A×K

K= VT        *1000000/VS*ε*d

VT=反应液总体积（ul）
VS=样本体积（ul）
d=比色杯光径（cm）
ε=摩尔消光系数
注：NADPH的活力以国际单位表示，即1L样品中NADPH在37℃每分钟催化氧化1μmol NADPH的酶活力为1个酶活单位（U/L）
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4楼2009-08-22 13:15:50
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