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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 农林综合 » 【求助】有没有测定植物叶片内源激素的同学啊
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younggatt

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
seamuse(金币+2):感谢！ 2010-02-03 20:21
用ELISA方法步骤很多，用HPLC方法造值较高，光标准样的准备就得花你很大一部分钱。我做过的ELISA方法供你参考：
选4棵幼苗，叶片取倒3片全展叶，去叶脉后，每重复称取0.5g；同时剪取根末端白色幼根部分，吸水后每重复称取0.5g，每处理重复3次，加2 mL样品提取液（80％甲醇，内含1.0 mmol•L－1二叔丁基对甲苯酚），在冰浴中研磨成匀浆，转入10 mL试管，再用2 mL提取液分次将研钵冲洗干净，一并转入试管中，摇匀放在4 ℃冰箱中静置4 h后，以1000×g离心15 min，取上清液过C-18固相萃取柱，再将过柱后的样品转入10 mL塑料离心管中，氮气吹干后储于-20 ℃下备用。测定参照何钟佩[14]书中方法用间接酶联免疫吸附分析法（Enzyme-linked immunosorbent assays， ELISA）检测脱落酸（Abscisic acid, ABA）、玉米素核苷（Zeatin-riboside, ZR）、生长素（Indoleacetic acid, IAA）、茉莉酸甲酯（Methyl jasmonate, MeJA）和赤霉素（Gibberellin, GA3）含量。
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把简单的事情重复重复再重复就成功了
21楼2010-02-03 15:13:06
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sh369

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
seamuse(金币+3):感谢提供信息！ 2010-02-05 13:17
本帖内容被屏蔽
22楼2010-02-04 17:21:33
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huangyuan838

金虫 (正式写手)
谢谢大家，开年再试试看。祝大家新年快乐。
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23楼2010-02-04 19:26:05
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zhuxiancan

至尊木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
zhuxiancan@126.com
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24楼2010-02-05 08:27:31
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chengdongdong

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
还是用液相测定比较可靠，方法也成熟
查一下激素方面的文献，有很多，关键是控制好前处理，前处理杂质太多的话会出很多峰，并且拖尾现象严重。如果样品送出去做前处理也是自己来处理，没人会给做前处理的，前处理一定的仔细认真，当然器皿干净是第一要素了，先做个预试验，看看自己处理的怎么样，好好加油！
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25楼2010-03-24 11:44:14
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chengdongdong

银虫 (小有名气)
还是用液相测定比较可靠，方法也成熟
查一下激素方面的文献，有很多，关键是控制好前处理，前处理杂质太多的话会出很多峰，并且拖尾现象严重。如果样品送出去做前处理也是自己来处理，没人会给做前处理的，前处理一定的仔细认真，当然器皿干净是第一要素了，先做个预试验，看看自己处理的怎么样，好好加油！
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26楼2010-03-24 11:44:46
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