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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教蛋白亚细胞定位问题
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jiahaitao1016

金虫 (小有名气)

[交流] 请教蛋白亚细胞定位问题

我想研究一下某种蛋白在细胞内的定位，看它在哪个亚细胞组分内，什么位置。自己初次接触这个，什么也不懂，各位谁做过，能否介绍一下，或者发份资料看看啊！有现成的方法就更好了！谢谢了！！！！
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1楼 2009-06-13 19:17:51
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350784478

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你可以先做个免疫组化，看看蛋白在哪表达，或者查看一下文献，看看有没有相关的报道。
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朝为田舍郎，暮登天子堂。将相本无种，男儿当自强。
2楼2009-06-13 21:08:54
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charlies929

至尊木虫 (正式写手)
★
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将该蛋白的cDNA与EGFP都构建在真核细胞表达质粒上，使之在细胞内共表达，通过荧光显微镜或者荧光共聚焦就可以清楚观察该蛋白在细胞内的分布。
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3楼2009-06-13 21:17:20
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jiahaitao1016

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 350784478 at 2009-6-13 21:08:
你可以先做个免疫组化，看看蛋白在哪表达，或者查看一下文献，看看有没有相关的报道。

目前没有相关文献报道在亚细胞哪个位置，请问免疫组化怎么做？能提供点资料吗？
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4楼2009-06-14 00:52:18
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生物之渊

铜虫 (小有名气)
★
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先做荧光共聚焦就可以清楚观察该蛋白在细胞内的分布;电镜照片可以观察它亚基的数量等;
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5楼2009-06-14 09:16:36
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gastrodia

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你先用软件分析一下该蛋白的序列，预测一下可能的定位
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6楼2009-06-14 12:25:50
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ligang418

金虫 (正式写手)
amisking(金币+0,VIP+0):欢迎发帖交流！ 6-14 14:13
还是做个免疫组化吧！看看到底定位在什么地方，初步分析一下可行性。这方面的资料都大同小异，在网上或者其他资料上都能找见。
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7楼2009-06-14 13:49:33
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jiahaitao1016

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gastrodia at 2009-6-14 12:25:
你先用软件分析一下该蛋白的序列，预测一下可能的定位

我做过这方面的分析，预测结果定位在细胞核中，但根据文献推测可能在胞浆中分布，所以想做个亚细胞定位看看。谢谢指点！
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8楼2009-06-14 14:27:26
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