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shuimuzhao

金虫 (初入文坛)

[交流] 求助一个可以将寡核苷酸串联起来并且克隆到报告基因上游的一个PROTOCOL

问题是这样子的,我要构建一个可以被某个转录因子特异激活的报告基因,因此需要把这个转录激活因子的DNA结合序列(大约30个碱基对)串联起来,一共需要八个这样的元件,也就是要240个碱基对,以构成一个增强子样的序列,插入到报告基因的上游,激活报告基因转录。
现在文献上对如何串联双链寡核苷酸都是一笔带过,有哪位分子生物学的精英能为我提供一个好的PROTOCOL。
这应该是分子生物学中很重要的一项实验,对大家以后的实验可能很有用,希望大家踊跃参与,一起交流讨论!
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pph0259

木虫 (正式写手)


shuimuzhao(金币+1):谢谢参与
有钱的话,就别瞎折腾,直接合成!
3楼2009-06-13 21:39:08
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ilaveu

木虫 (著名写手)


shuimuzhao(金币+1):谢谢参与
可以用长片段引物做PCR
中间互补一小部分,

我用过长片段引物120bp
更长的都可以合成
在国外合成的 7.5元/碱基
2个周内交货
2楼2009-06-13 21:03:47
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bbyu007

木虫 (正式写手)


shuimuzhao(金币+1):谢谢参与
直接合成比较快!折腾啥
我是笨笨鱼~~~
4楼2009-06-13 21:54:51
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