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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 大家过来看看我的胶是怎么回事？
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
★
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引用回帖:
Originally posted by wlt728 at 2009-6-12 16:33:
我的缓冲液没有过期，刚配的跑出来也是那个效果。我们目的带在2W左右
我们浓缩胶是5%，分离胶是15%
我觉得是丙烯酰胺浓度的问题，不过我们是按着药典上配的！我再重新配下Tris，减少上样量看看吧！

20kD的蛋白不用15%的浓度，太高了，用11-12就足够了，但是这不是主要原因，还是你的聚丙烯胶本身有问题，检查一下试剂，配的时候让胶一定要混匀并且倒入之后要保证胶全部凝固
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会当凌绝顶，一览众山小
11楼2009-06-14 15:38:49
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人
感觉胶的浓度有些问题
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细推物理须行乐。
12楼2009-06-14 15:40:43
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shirley7216

木虫 (小有名气)
加样太多，
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simon
13楼2009-06-14 22:44:34
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bcl_1984

木虫 (著名写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by sutao1979 at 2009-6-14 15:38:


20kD的蛋白不用15%的浓度，太高了，用11-12就足够了，但是这不是主要原因，还是你的聚丙烯胶本身有问题，检查一下试剂，配的时候让胶一定要混匀并且倒入之后要保证胶全部凝固

同意
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谁说我丑，只是美的不明显而已！！！
14楼2009-06-15 09:30:14
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★
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显然是胶的浓度过大了，
12.5%的差不多。

另外，你的样品模糊啊。。

（1）新鲜制备的样品一定要零下20-40℃保存，最好尽快跑胶。
（2）胶配置的成分或样品Buffer可能有问题
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
15楼2009-06-15 12:01:32
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)
哦，那谁能给我一个12%胶浓度的配方啊！我再试试！再就是样品的buffer，我试试看好使不！
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I am not a hero , but I served with heroes！
16楼2009-06-26 22:23:00
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wlt728 at 2009-6-26 22:23:
哦，那谁能给我一个12%胶浓度的配方啊！我再试试！再就是样品的buffer，我试试看好使不！

请看以下的连接，相信对你会有帮助的。
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1262941&fpage=1
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
17楼2009-06-27 00:46:17
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林祎

木虫 (正式写手)
★
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你做的胶块好像不均一，最底下好像胶浓度较大
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18楼2009-06-27 02:00:15
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liguanjun

银虫 (小有名气)
★
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可能是分离胶的浓度有点高了，我们都用的12% 你可以试试看
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19楼2009-06-27 10:46:09
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恒星年

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能是缓冲体系有问题，胶母液的浓度可能不是很准，所以你配出来的胶浓度与你预期的不符合。
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20楼2009-06-29 11:21:49
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