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薛长大

新虫 (初入文坛)

[交流] 乳酸菌复苏后培养的问题 已有1人参与

刚培养完菌之后用倾注平板法计数,菌落浓度达到了10^8。
然后想试一下冷冻保存之后菌落浓度能达到多少,查阅文献之后把菌种重悬保存到了12%的脱脂牛奶中,冷冻到-80℃,大概十天,拿出来复苏,在38℃水浴解冻了大概五分钟,然后倍比稀释再倾注平板。但是现在都第二天了,菌长的还是很不好,基本上只能到10^5。想请问一下这是哪出了问题呢?是不是菌种刚复苏需要培养的时间更长呢?
我是想把菌培养出来然后灌胃小鼠,制备一次菌时间太久了,所以想冷冻起来方便每天使用。所以请教各位,有什么办法可以保证菌落浓度达到10^8以上呢?需要做成冻干粉吗?
实验小白,第一次独立实验,实验室方向是生理,所以师兄师姐也不太懂,谢谢大家了!
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路亚路亚

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
-80度冷冻后的菌,复苏的培养时间比较长,要多传几代才能提高菌的活力。长期保存菌种才需要用的-80.
如果你是短期内多次使用,只需要用液体培养基或者生理盐水加点保护剂(视菌种而定),放在4度就行。
至于4度的菌液在多长的保存期限内能够满足你实验的要求(活力和菌浓),就需要你自己隔一段时间做一做实验,摸索一下就行。
2楼2019-12-17 17:47:42
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