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quan1103

木虫 (小有名气)

[交流] 【原创】关于做胞外基质western 的问题

我现在做细胞外基质的western主要是测collagen I and III 和elastin提取细胞的上清液进行检测,但老是做不好,请高手给些建议我用的条件是7.5%的胶,4°转膜过夜.抗体是ABcam的,急啊!不胜感激
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不好的具体是什么呢……
上图吧
2楼2009-06-11 15:41:18
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quan1103

木虫 (小有名气)

就是条带很浅,我认为老是转膜条件不好摸,并不像网上说的那种,所以想借鉴一下有谁做过,给个参照.
3楼2009-06-12 09:42:10
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的预染marker有没有完全转过去?
转膜我我一般都是100V恒压转,按照胶的厚度以及分子量大小决定转膜时间
从来不转过夜,很容易发热降解
你说的4度是外部温度,膜上可能就不止了
4楼2009-06-12 09:45:41
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