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背对过去式

铁虫 (小有名气)

[求助] co-ip水稻原生质体核蛋白提取 已有1人参与

用水稻原生质体做co-ip,是个核蛋白,转带GFP标签的质粒,荧光显微镜下看到荧光很强,提完蛋白离心取上清,western检测不到,最后发现都在沉淀里了,是蛋白不溶,还是核膜没有破开,求大神帮忙,谢谢。

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我就是我
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PH=6

新虫 (初入文坛)

您这个做出来了吗?您的蛋白多大呢?

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2楼2020-01-17 08:55:25
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wanghm200810

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以使用 INVENT SD-008/SN-009提取总蛋白,如果需要分离干净的细胞核可以用植物胞质胞核分离试剂盒 PF-045
Changeyoursciencespeed!
3楼2020-01-17 15:29:00
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背对过去式

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by PH=6 at 2020-01-17 08:55:25
您这个做出来了吗?您的蛋白多大呢?

没有做出来,40-50KD左右

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我就是我
4楼2020-01-30 00:27:22
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ywl13

银虫 (初入文坛)

请问您这个做出来了吗?我也一直被困在这个问题中,没有解决!
5楼2022-03-25 20:56:23
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1772701

新虫 (初入文坛)

您好 最近也在做原生质体提蛋白做coip 请问质粒转染后需要四度孵育吗还是常温孵育

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6楼2023-07-29 14:14:15
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