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信天谨游新虫 (正式写手)
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求助，蛋白条带跑散了怎么办 已有1人参与
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实验新手，这个问题困扰了好久，感谢大家给予意见。 我跑电泳Marker 每次都没有问题，纯的蛋白跑出来也没有问题，条带清晰。用10%的胶，但是用表面活性剂和盐处理过得蛋白都会跑散，也没有条带出来。我的目标蛋白分子量是66K 的，但是PEG6000在水中的水化半径为25-35K ，有什么好的办法除去PEG吗？ 发自小木虫Android客户端 |
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信天谨游
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用过TCA 沉淀法还有硫酸铵沉淀法都会分相，丙酮沉淀法PEG会析出，还有10K 超滤膜，还有14000的透析袋都透不过PEG 。试过很多方法了，实在没办法了，一直卡在着。各位老师有什么建议吗？ 发自小木虫Android客户端 |
2楼2019-12-03 16:55:45
信天谨游
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PEG可以溶于水也可以溶于乙醇，用无水乙醇900ul加100ul含PEG 的样品，发现有PEG析出，可能是溶解度没那么高吧。但是不知道此时蛋白有没有沉淀，那我是不是可以离心之后，再用无水乙醇去沉淀一次，把没融的PEG去除了。不知这样是否可行，因为不确定这样的话乙醇还能否起到沉淀蛋白的作用？ 发自小木虫Android客户端 |
3楼2019-12-03 17:00:50
4楼2019-12-05 08:45:22