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补阙拾遗，您的液相可能出现的问题，都在这个文集里了（何必原创）已有1人参与
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流动相要点，日常检查 https://mp.weixin.qq.com/s/nEwhwLl7NKRlCgLgPwOs1A 峰形不好怎么办？-方法开发之峰形优化 https://mp.weixin.qq.com/s/nYQngGbpm6JQzfKIqPUDdQ 干货来袭---2695日常维护和常见故障处理 https://mp.weixin.qq.com/s/_vx6JvSIDKeE8a9r3lVmaQ 液相色谱柱专题：雷铁柱的一生 https://mp.weixin.qq.com/s/gInVdvccpyDfBVRt_vHzXw 液相色谱柱专题（二）：色谱柱的使用、维护、再生 https://mp.weixin.qq.com/s/Z_OIcaA6DCApdaSh1dn2tw 精卫衔微木，将以填沧海。日积月累，共同学习，以求进步。 高效液相色谱仪是分析实验室普遍应用的分析仪器，我们之前介绍过很多使用过程中可能出现的仪器问题以及相应的处理方法（文章下方链接）。然而，很多时候，检测结果的异常现象并不是仪器故障引起的。今天，我们一起看一下，还有哪些其他因素会导致仪器出现异常情况。 一， 采样管 HPLC是非常精密的分析仪器，微克乃至纳克甚至匹克的杂质，都有可能被检测器捕捉检测出来。无论是进样小瓶还是前处理过程中可能会用到的试管，都能够污染样品，进而对检测结果造成影响。若果样品瓶清洗不规范，或者使用质量不合格的橡胶塞盖子，就会使检测图谱中出现鬼峰。因此，保持进样小瓶以及前处理试管的清洁，对于顺利得到检测结果至关重要。 此外，如果在前处理过程中使用塑料试管，要小心有机试剂对于塑料试管的溶解现象。比如，氯仿就可能会将一次性塑料试管中的物质溶解提取出来。所以，在确定检测方法前，做好先将整个实验过程用空白试剂做下对比，以便排除处理设备对检测结果带来的影响。 除了试管中的物质有可能会被粹取出来，溶液样品中的样品物质也有可能会附着到试管壁上，从而使定量不准。例如，阿米替林，丙咪嗪等药物，在进行药物检测（TDM）的过程中，一般采用0.5%的乙二胺己烷作为提取液，用来防治吸附。 二， 进样阀 我们现在常用手动进样发进行进样，这样效率高，准确度强。不过有些时候，为了解决成本，也可以采用手动进样，最常见的手动进样阀是7725i型，它利用六通法的切换实现样品转移和信号触发的功能。如果在检测过程中，出现色谱峰异常或重现性差的问题，可以从以下几个方面入手。 进样量。手动进样阀一般是通过定量环来控制定量的，这时候要让进样量大于样品定量环的体积，样品充足的情况下，可以让进样量达到进样体积的2倍为宜。定量环常见体积有10ul.20ul.50ul等等。如果想用注射器控制进样量，首先要确认定量环体积足够，其次保证进样过程中，注射器内不要有气泡。 污染。为了防止进样残留造成的污染，可以在进样前在inject和load的位置，分别注射流通相清洗。 堵塞。如果出现堵塞现象，多半是盐溶液析出造成的，这个时候，可用小烧杯盛装蒸馏水，对进样阀的溢流管进行浸泡，等结晶溶解即可。在每次进样完成后，用蒸馏水冲洗，可有效防止这种现象发生。 三， 流动相 流动相要经过脱气和过滤处理。北京雷泰仪器出售的waters2695和agilent1100/agilent1200都具有在线脱气装置，能够进一步避免流动相中出现气泡的情况。当然，除了脱气之外，过滤也是必不可少的步骤，尤其是当流动相含有盐的情况。一般采用0.5um滤膜抽滤即可。 四， 色谱柱的使用和保养 色谱柱是液相色谱分离技术的核心部件。色谱柱的状态直接影响分离效率和峰形，进而对检测结果造成影响。 一般而言，在色谱柱之前加装预柱，能够有效的防止色谱柱污染的情况。预柱和色谱柱填料相同。如果预柱（pre-column）脏了也会使图谱峰形变差，甚至分叉，因此要定期更换，以便维持预柱的使用效果。 为了保证色谱柱的性能， 在每次使用完成后要冲洗色谱柱。冲洗的目的是将色谱柱内没能被流动相完全冲出来的强吸附物质洗脱。同时，也要将其中的盐类物质置换出来。不同的色谱柱，清洗维护的方法不同。我们往期的文章中也有详尽的方法，可以点击文末链接进行查看。 今天的文章就到这里啦，看完之后您有什么疑问或者收获呢？小编微 信： HHAPPE ,欢迎私信后台或者在下方留言,为您答疑解难。 |
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