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多肽阵列
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多肽阵列是一种新型生物芯片，是后基因时代揭示各种疾病和生化现象的最直接的研究技术。该技术是将任意设计的氨基酸序列—多肽，在经过特殊处理的芯片上予以高密度地原位合成，每张芯片可承载几千个甚至更多的原位合成多肽。该技术主要能用于检测蛋白质与其他蛋白质或物质（如多糖、核酸、化学合成物等）的结合位点/域。该阵列技术可以根据已知蛋白的氨基酸序列，按序列漂移原则在芯片上原位合成多肽氨基酸序列，或者也可以根据待测物质的结构任意合成氨基酸序列，并将这些多肽按一定次序高密度地排列在芯片上。然后将测试物质和芯片反应，经过免疫检测技术发现与测试物质有结合反应的位点/域，然后把数据输入计算机进行蛋白质三维结构处理，从而寻找到蛋白质与测试物质的结合部位。 多肽阵列技术的主要特点包括： 1. 高密度、高通量：可同时测定上万个蛋白-多肽生化反应； 2. 高特异性：深层揭示蛋白结合机制，准确定位抗体特异表位和蛋白结合区域； 3. 成本低、周期短、操作简单：基于化学合成的多肽阵列芯片成本为基于生物培养的抗体芯片、全蛋白芯片的数百分之一； 4. 准确可靠（纯度稳定、结果明确、直观、易分析）。 多肽阵列技术的应用： 1、基础科学研究：使用多肽阵列技术，研究者们能够进行目标蛋白质与其效应因子结合位点的高通量筛查，例如胞内激酶结合域筛查，以及疾病中功能失调蛋白结合位点指纹图谱变化检测。 2、疫苗开发:一个抗原表位是相应抗体识别的一种免疫原的一个表面结构域。通过多台阵列技术,一种病毒或细菌的所有蛋白能被置于芯片上,并与不同病程的患者血清反应。反应位点或结合域被进一步筛查以发现针对保护抗体的特异抗原表位。之后这一抗原表位可被用于主动或被动的特异性免疫反应。 3、药物开发:多肽阵列也能加快药物研究及开发的进程。使用 Pep -Hit技术,研究者们能够一次合成成百上千个非自然多肽用以测试目标蛋白,从而促进活性抑制物或竟争结合物的发现,这些抑制物或竞争结合物能用于后针对疾病治疗的候选药物开发。同样,许多其它生物分子或化合物也能用多肽阵列技术进行其与目标蛋 白的相互作用研究。用上述多肽阵列技术进行的药物开发,快速,灵活、且能实现高通量。 4、诊断试剂盒开发:许多病源体(细菌或病毒)的抗原表位可接在生物芯片上合成并与患者样品反应(如血清,尿液,粘膜分泌物),最后通过检查反应的指纹图谱使得许多疾病的快速诊断成为可能。 |
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