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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酵母双杂交
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liaoyongqiang

银虫 (正式写手)

[交流] 酵母双杂交

我现在正准备做酵母双杂交，遇到一个问题就是，在配置缺陷培养基的是否要加入抗生素，例如我构建的BD重组载体抗卡那霉素，那么在转化重组质粒的时候，要涂布到缺陷培养基平板上培养，是否要在缺陷培养基里面加卡那霉素？
        向各位师兄师姐请教！小弟感谢不尽！

[ Last edited by amisking on 2009-6-10 at 12:01 ]
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认真做学术，开心生活。
1楼 2009-06-10 11:08:49
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大海一孤舟

铜虫 (小有名气)
★
liaoyongqiang(金币+1,VIP+0):哦，谢谢，我的是有缺陷菌 6-10 15:40
你的缺陷菌如果有卡那抗性就可以加
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2楼2009-06-10 14:27:23
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灿烂的笑脸

新虫 (初入文坛)
质粒有抗性就需要加
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3楼2009-09-17 09:52:37
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银杏下

金虫 (小有名气)
★
liaoyongqiang(金币+1,VIP+0): 9-19 15:19
不需要加，所谓抗性是在大肠杆菌中构建质粒需要加的抗性，而在转化酵母时kana不能起到筛选作用，所以才需要用缺陷型。对于这种穿梭质粒要特别注意各个区域所对应的宿主作用。
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4楼2009-09-17 13:10:48
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lzhwin

木虫 (正式写手)
楼上正解

楼主好像没有仔细读那个GBK质粒的说明书啊。卡纳用于大肠杆菌筛选，在多克隆位点前面那段才是导入酵母后的筛选基因
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5楼2009-09-19 21:36:29
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蓝皮鼠7983

至尊木虫 (文坛精英)

飞过蓝天
你的缺陷菌如果有卡那抗性就可以加
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海到尽头天做岸，山登绝顶我为峰。
6楼2009-09-20 01:05:39
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