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肥桃乌龙

新虫 (初入文坛)

[求助] pcDNA3(JM109)空载菌无法收菌

大量表达培养pcDNA3(JM109)空载菌,收菌时沉淀总是散,成流沙状 絮状无法收集。

培养步骤如下:
1、负80度冻存菌摇菌活化过夜再划平板
2、待平板长出菌落,每试管🧪3ml LB/Amp 培养基,挑取一个菌落,摇菌过夜,37度220rpm
3、以上菌液12ml 加入600ml LB/Amp培养基(每瓶加入380ul Amp),37度180rpm

收菌时用50ml大离心管,6000g离心10min 25min 均收不起来,2ml离心管12000rpm 也无法收集
换了三批空载菌,重复了三次都是同样的结果
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