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Peytonren铁虫 (小有名气)
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[求助]
如何解析一个蛋白的结构?
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如题,萌新最近想解一个转录调控因子的结构, 我是不是首先要把这个蛋白的目的基因扩增出来,克隆到一个高表达的载体上(pET30质粒是不是可以自动带上6xHis标签,这个标签加在目的蛋白的哪端?)然后诱导表达后破胞提蛋白,然后将加了标签的目的蛋白纯化出来?那得到纯的蛋白后,结晶之前需不需要去掉6xHis标签?还有如何知道表达的蛋白是完整的目的蛋白? x射线衍射后,需要做什么? 生信相关的预测网站需要用到哪些呀? |
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