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jianghai6688木虫 (小有名气)
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[交流]
分离遇到困难，急求助！
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各位高手们： 我是搞中药化学的，在分离一个植物的过程当中遇到了薄层上紫色斑点的物质，而且经过反复的正相和反向柱层析后基本是一个点了，但是我的样品上了waters的分析液相后是全波长扫描的，柱子是ODS流动相是乙腈水，甲醇水不同浓度的都走了，但是就是在三分钟左右出峰，还有蒸发光检测器也是三分钟左右出峰，无法上制备液相制备它，有经验的人士说是我的样品在ODS上不保留，现在想请教各位高手怎么样解决这样的问题，比如建议我买个什么样的柱子，还有就是哪个色谱柱的厂家可以给我测试一下，我肯定就买哪家的分析柱子，甚至可以买制备柱子！谢谢各位大侠们！ |
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jianghai6688
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 4753
- 散金: 18
- 帖子: 218
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- 虫号: 528201
- 注册: 2008-03-18
- 性别: GG
- 专业: 中药炮制
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现在我正在做植物中化合物的分离工作，一部分样品，极性较大，是正相硅胶柱在流动相密度=1.290（二氯甲烷：甲醇）以后洗脱下来的样品，在反相ODS柱中60%-70%的甲醇水混合溶剂能够洗脱下来，薄层检识为紫色斑点，甲醇溶解度差，在其中有白色析出物，适量的水可以溶解，具有发泡性，怀疑是皂苷类化合物。 但该类物质在HPLC中没有办法进行检识，紫外与ELSD检测器串联，梯度10-100%甲醇（乙腈）-水洗脱60分钟，不出现色谱峰。等度10%甲醇（乙腈）水洗脱60分钟，等度15%甲醇（乙腈）水洗脱60分钟……，直到等度90%甲醇（乙腈）水洗脱60分钟，都不出现色谱峰。 后来我怀疑是样品的浓度太小检识不出来，就用DMSO将样品全部溶解，再次按照上面所说的各个梯度进行走样，我发现每个等度在2分钟左右，ELSD中都会出现高峰，而空白的DMSO中无此高峰，我估计这就是样品峰，但随着流动相极性的变化，保留时间无改变，我检查过整个液相系统，其他样品都能正常检识，就是这些样品不行，是否这类物质在ODS色谱柱中不保留，但在反相分离柱中却能保留呢？ 我已经检查了好长时间不知道是哪里出现了问题，所以想请您帮忙看一看。如果您还想知道有关样品的信息，可以给我发邮件，如果方便的话，我可以邮点样品给您，帮我检测一下，如果ODS色谱柱真的不适合这类样品，而您那有适合的填料色谱柱，我们可以购买。 |
4楼2009-06-09 20:14:17
3楼2009-06-09 18:59:43
jinzhongchong
木虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 988
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- 专业: 海洋药物
5楼2009-06-09 20:35:16
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jianghai6688(金币+1,VIP+0): 6-10 15:44
jianghai6688(金币+1,VIP+0): 6-10 15:44
| 我也感觉你这个样品应该是在ODS填料上没有保留啊，我想知道你为什么拿到纯品后没有进行结构鉴定而去用HPLC测定呢，是这样的，我认为你的化合物到底用什么型号的填料比较合适只能去试，没有办法根据经验判定的，我曾经分到一个小分子的胺类化合物和你的情况很相似，二氯甲烷：甲醇=4：1分离得到，甲醇重结晶纯化，结果该化合物没有紫外吸收，我用视差折光检测器检测，也是没有相应，问过好多人，都没有办法，后来也是去测定结构了！而且我感觉一般只有再确定硅胶柱确实没有效果才去考虑ODS柱的，不要过分的去迷信这些填料，硅胶对很多化合物都很有效的！ |
6楼2009-06-09 23:22:57
5