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lj0905

新虫 (小有名气)
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从cDNA上p片段，设计的引物一般多长？ 需要加保护碱基吗

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1楼 2019-11-16 14:11:39
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ap372767129

铁虫 (正式写手)
★
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一般需要在目的基因两侧添加酶切位点，再在酶切位点两端添加几个额外的碱基作为保护碱基。不过保护碱基需要你在网上查一下保护碱基添加几个，不同的限制酶需要添加不同数量的碱基方便切，添加少了限制酶识别不了。当然，正规的方法是先用taq酶把目的基因P出来连接T载体，然后再双酶切得到目的基因。否则你无法判断目的基因是否切成功
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45楼2019-11-22 22:15:50
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huxi_8

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
要构建到质粒上就要加酶切位点，保护碱基是加在酶切位点外侧。

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31楼2019-11-16 19:32:42
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liuqiang68

至尊木虫 (文坛精英)
加油

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12楼2019-11-16 14:41:24
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geer345

新虫 (初入文坛)
谢谢

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36楼2019-11-17 13:28:19
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hdchina20102楼
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Hailey-L3楼
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tzynew8楼
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hikingman9楼
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秋土豆香10楼
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herethere13楼
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taro118楼
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我乃小白19楼
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bodygb25楼
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