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铁虫 (初入文坛)

[交流] 求助,酶切6个碱基

最近做酶切,是用的双酶切,2个位点之间只有6个bp,做了几次都没有成功,这是因为2个酶切位点之间太近不能切啊,还是做的有问题。各位高人,帮帮忙吧!
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


message(金币+1,VIP+0): 6-9 10:52
试试分步切咯~~~
有时候很难说的
2楼2009-06-09 10:41:20
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zfszheng

新虫 (小有名气)


message(金币+1,VIP+0): 6-9 16:25
分步切先用低盐buffer,在用高盐buffer
3楼2009-06-09 11:37:49
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lifeip

至尊木虫 (知名作家)


message(金币+1,VIP+0): 6-9 16:26
分步切,另外用NEB的酶试试。
4楼2009-06-09 12:07:58
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jqq1985

银虫 (正式写手)


message(金币+1,VIP+0): 6-9 16:26
分布酶切,另外看看这段序列有没有被甲基化——有些酶对甲基化敏感
5楼2009-06-09 12:43:31
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大海一孤舟

铜虫 (小有名气)


message(金币+1,VIP+0): 6-9 16:26
分步切,两种酶同时切时,较强的酶会占据另一酶的位点。
6楼2009-06-09 14:27:46
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bbyu007

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果共用相同buffer应该没问题。。。
但是,建议分步酶切,第二步直接扩大酶切体系,当然先用低盐buffer酶切更好!
我是笨笨鱼~~~
7楼2009-06-09 16:48:26
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