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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 原生质体再生后出现的问题
汕头大学海洋科学接受调剂
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rack85

金虫 (正式写手)

小号超人

[交流] 原生质体再生后出现的问题

各位XDJM，不知道有没有做原生质体再生的？小弟做的是一种丝状真菌，原生质体再生（在高渗培养基，加0.7M的NaCl的PDA培养基）后在PDA培养基不能生长。也试过加0.6M和0.5M的NaCl，必须一步步降低浓度才能生长，而且生长速度很慢。请问有没有遇到相似情况的师兄师姐？如何解决的呢？万分感谢！
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1楼 2009-06-09 08:52:45
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guanni1011

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我做的酵母的原生质体融合，用的再生培养基里加的是KCl，长的也挺慢的，大概3天吧，只要能长出来能计数就行，这只是计算再生率，你又不会用这些做后续实验，不要太强求，摸索好酶解的条件和后面融合的条件才是重要的。我有一个酶解的心得，酶解的时候不要放入摇床中，静置放在水浴中，我放在摇床中酶解时，观察发现菌体很多都破裂了
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7楼2010-02-04 11:26:37
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jeakmin

新虫 (初入文坛)

好像很多的高渗培养基都很难长

★
rack85(金币+1):谢谢参与
本人做的要4天才长出来耶。。。哪位高手指点一下呀……
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2楼2009-06-09 09:25:59
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lishu2003528

新虫 (初入文坛)

是不是营养因子不全？

★ ★ ★
rack85(金币+1):谢谢参与
rack85(金币+2,VIP+0):谢谢，英雄所见略同。 6-10 15:57
可能培养基中缺少一些有利于再生的必须离子吧，比如镁离子和钙离子。
还有你换成蔗糖高渗培养基试试。
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3楼2009-06-10 10:23:05
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rack85

金虫 (正式写手)

小号超人
引用回帖:
Originally posted by lishu2003528 at 2009-6-10 10:23:
可能培养基中缺少一些有利于再生的必须离子吧，比如镁离子和钙离子。
还有你换成蔗糖高渗培养基试试。

应该不是缺少这些东西，不过我已经用蔗糖和葡萄糖配制的高渗培养基来试验了，希望可以成功。
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4楼2009-06-10 15:57:08
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