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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 学术交流区 » 论文投稿 » 投稿求助 » 审稿意见让补 in vitro kinase assays， 是什么呀，求指点
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nvwangzzh

金虫 (正式写手)

女王

[求助] 审稿意见让补 in vitro kinase assays， 是什么呀，求指点 已有1人参与

There should be in vitro kinase assays performed to examine the inhibitory activities of convallatoxin on JAKs, Src, and PI3K.
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1楼 2019-11-07 16:19:37
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songcumt

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by nvwangzzh at 2019-11-07 18:18:05
我都通过蛋白免疫印迹测了啊。我不明白还需要补什么实验，求指点...

对你这个不是很了解，你这个蛋白免疫印迹测试是他想表达的意思？
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4楼2019-11-07 20:29:50
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songcumt

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
nvwangzzh: 金币+20 2019-11-07 20:16:49
这个意见不是很明白了吗？让你补充个实验，检测convallatoxin对JAK、Src和PI3K的抑制作用。
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2楼2019-11-07 18:02:55
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nvwangzzh

金虫 (正式写手)

女王
引用回帖:
2楼: Originally posted by songcumt at 2019-11-07 18:02:55
这个意见不是很明白了吗？让你补充个实验，检测convallatoxin对JAK、Src和PI3K的抑制作用。

我都通过蛋白免疫印迹测了啊。我不明白还需要补什么实验，求指点
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3楼2019-11-07 18:18:05
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zsw2366

捐助贵宾 (初入文坛)
in vitro kinase assay 是指在体外条件下（适当的缓冲体系），采用1.重组的激酶(JAKs, Src, and PI3K.)与这些激酶适当的2.蛋白底物，加上放射性标记ATP[磷32]，在无或者有抑制剂的条件下孵育一段时间之后，跑蛋白电泳。将跑完电泳的胶，与X光片共同孵育一段时间，几天到一周不等。如果你的蛋白底物发生磷酸化，则被P32标记，在该底物分子量的位置，将会有放射性自显影条带。如果你的抑制剂起作用的话，响应条带的强弱将降低。
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nvwangzzh
5楼2019-11-21 20:00:02
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