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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » GFP N端氨基酸缺失会影响发光吗
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zoeshen

新虫 (小有名气)

[交流] GFP N端氨基酸缺失会影响发光吗 已有1人参与

载体是pCAMBiA1302,上面的标记基因mGFP5*, 这个gfp在野生型基础上进行了改造，在N端加了四个氨基酸（VDLT），C端加了9个氨基酸（ASHHHHHHV），且在中间进行了四个氨基酸突变。现在我构载体时，去掉了m GFP5 * N端的三个氨基酸（VDL）。虽然有氨基酸缺失了，但仍保留着野生型GFP的全部氨基酸序列，请问这会影响我的GFP发光吗 谢谢

另外，目的基因带有起始密码子，去掉了终止密码子，GFP直接连在了目的基因的C端（不带起始密码子）。

请问我的材料最后能发光成功吗？

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1楼 2019-11-02 13:38:20
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biosci

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myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流，为分子生物板块发展助力。 2019-11-04 19:36:29
融合蛋白能表达就能发光

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2楼2019-11-03 07:36:10
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zoeshen

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2019-11-03 07:36:10
融合蛋白能表达就能发光

我怎么确认融合蛋白是否正确表达了呢

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3楼2019-11-03 08:39:56
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biosci

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看蛋白电泳条带大小，可以做gfp的wb检测

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4楼2019-11-03 10:43:47
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zoeshen

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by biosci at 2019-11-03 10:43:47
看蛋白电泳条带大小，可以做gfp的wb检测

好的 明白了 不过我今天在共聚焦下看见光了
所以应该能发光 谢谢

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5楼2019-11-04 14:12:44
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