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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 测酶热稳定性
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小激动yo

新虫 (正式写手)

[求助] 测酶热稳定性已有1人参与

做辣根过氧化物酶，看看这个酶的热稳定性。将酶在30-60℃下保温不同时间，测定酶活性（加TMB显色，酸终止反应，测OD值）。所以变量有两个，一是不同温度，二是不同保温时间。
现在有两个问题请教各位大神
1.TMB应该何时加入酶中？保温前还是保温后？
2.检测酶活需要加过氧化氢么？@hc-material
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1楼2019-11-01 12:12:00
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dppdpp

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
能加微信吗？我以前是做酶的热稳定性的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2019-11-01 22:44:51
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小激动yo

新虫 (正式写手)
别沉哇
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3楼2019-11-02 12:46:17
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car_adsor

新虫 (正式写手)
楼主，你好，我最近做辣根过氧化物酶催化双氧水、TMB的显色反应，现把HRP和双氧水混合，之后加入TMB，在加入的瞬间，颜色变化为蓝到绿到黄，变色是瞬间的，请问楼主知道这是什么原因吗
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4楼2019-11-30 17:27:45
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小激动yo

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by car_adsor at 2019-11-30 17:27:45
楼主，你好，我最近做辣根过氧化物酶催化双氧水、TMB的显色反应，现把HRP和双氧水混合，之后加入TMB，在加入的瞬间，颜色变化为蓝到绿到黄，变色是瞬间的，请问楼主知道这是什么原因吗

首先，TMB是来自试剂盒么？如果是，那么里面已经含有双氧水。无需额外添加。
其次，TMB是无色，正常情况应该是有无色变为蓝色，几分钟后变为深绿色。如果变黄，我猜是存在酸。因为添加酸终止反应时，才会显黄色。
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5楼2019-12-05 16:40:21
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天秤座摩羯座

新虫 (小有名气)
买来的HRP粉末只需要溶在PBS中就可以吧

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6楼2019-12-09 09:35:03
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天秤座摩羯座

新虫 (小有名气)
欢迎加入固定化酶讨论群，群聊号码：981518320

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7楼2019-12-09 09:35:19
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天秤座摩羯座

新虫 (小有名气)
我们弄个群讨论一下吧

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8楼2019-12-09 09:35:30
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ljj52677

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 天秤座摩羯座 at 2019-12-09 09:35:19
欢迎加入固定化酶讨论群，群聊号码：981518320

请问这个群现在还可以加入吗？
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9楼2022-01-06 16:41:32
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425920围脖

新虫 (初入文坛)
你好楼主，请问tmb是保温前还是保温后加入酶中呀

发自小木虫Android客户端
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10楼2022-11-02 16:10:01
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