| 查看: 4144 | 回复: 13 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
YJX009863新虫 (正式写手)
|
[求助]
DNS试剂测定α-淀粉酶抑制剂活性 已有1人参与
|
|
|
大家好，本人想测定某种物质对α-淀粉酶的抑制作用。采用的是DNS法测定产物糖的方法。 我是自己提取天然产物，然后买淀粉酶，测定天然产物对淀粉酶的抑制作用。 根据文献的步骤：精确吸取 0. 25mL的样品 和 0. 25 mL 2mg/mL的α-淀粉酶溶液，充分混匀，在 37℃水浴中反应10 min，然后加入0.5mL 2%可溶性淀粉液，在 37 ℃水浴中准确反应 5 min。再加入 0.5mL DNS 显色剂，在沸水浴中反应 6 min，之后立即用流动自来水冷却 (终止反应)，用PBS稀释10倍在 540 nm 波长下测定吸收度，记为 OD。 样品、2%可溶性淀粉液及酶液都是用PBS配置的。3,5-二硝基水杨酸(DNS)溶液配置:精确称取 6.3 g DNS和 262 m L 2 mol.L-1的氢氧化钠溶液，加入含有 182 g 酒石酸钾钠的 500 m L 温度为 50℃左右的热水溶液中，再加入结晶苯酚 5 g，亚硫酸钠 5 g，充分溶解，冷却至常温后加水定容到 1 L，贮存于棕色瓶中，即成 DNS 溶液，室温下放置 7 d 后使用。 但是根据这个步骤做出来，样品组（样品+α-淀粉酶溶液），空白对照组（用pbs代替样品，其他同上），煮沸6分钟后，红棕色颜色很深，PBS稀释后，样品组OD值与空白组OD值几乎差不多，有几次做还会比空白组高。还不知道是什么原因？ 求大神帮忙，我是试了好多还不出满意结果，感觉奔溃了！谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
材料与化工（0856）304求B区调剂
已经有11人回复
-
211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自动化所实习
已经有3人回复
-
297求调剂
已经有4人回复
-
【0703化学调剂】-一志愿华中师范大学-六级475
已经有5人回复
-
282 求调剂
已经有3人回复
-
材料080500调剂求收留
已经有3人回复
-
331求调剂（0703有机化学
已经有6人回复
-
308 085701 四六级已过求调剂
已经有14人回复
-
297一志愿上交085600求调剂
已经有3人回复
-
学硕285求调剂
已经有46人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
海韵楠馨
新虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 227.6
- 散金: 10
- 帖子: 58
- 在线: 6.9小时
- 虫号: 26097371
- 注册: 2021-03-31
- 性别: GG
- 专业: 中药药效物质
10楼2021-04-06 20:11:25
chaosl911
铜虫 (职业作家)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 20424.6
- 散金: 5
- 红花: 8
- 帖子: 3784
- 在线: 818.4小时
- 虫号: 1998972
- 注册: 2012-09-13
- 专业: 天然药物化学
2楼2019-10-31 20:54:21
YJX009863
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1324.4
- 帖子: 572
- 在线: 30.6小时
- 虫号: 12912333
- 注册: 2018-11-20
- 性别: MM
- 专业: 药物分析
3楼2019-10-31 20:59:05
6楼2019-12-26 17:55:55
