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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » 植物材料做chip实验，配置各种提取缓冲液，放室温过夜，有什么影响吗
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prthefu

木虫 (著名写手)

[求助] 植物材料做chip实验，配置各种提取缓冲液，放室温过夜，有什么影响吗

植物做chip，在网上参考相应资料，配置各种提取缓冲液和核裂解缓冲液，里面有PMSF，还没有加蛋白酶抑制剂，所以想问一下，室温放置过夜后，再加混合型的蛋白酶抑制剂还可以用吗？
在配置过程中，尝试放冰上，但是，发现加的蔗糖会有沉淀，并且，Triton在冷的状态下也不能溶解，所以才选择室温。但不太清楚是不是有影响。
请各位指教。
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1楼 2019-10-22 10:09:23
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花随人愿

银虫 (小有名气)
最好放4度吧，用之前提前拿出涡旋混匀溶解后再用，pmsf半小时后就失效了，最好是用的时候现用现加。

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2楼2019-10-22 13:04:17
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prthefu

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 花随人愿 at 2019-10-22 13:04:17
最好放4度吧，用之前提前拿出涡旋混匀溶解后再用，pmsf半小时后就失效了，最好是用的时候现用现加。

我想问一下，PMSF是一种蛋白酶抑制剂，但是我还要在各自缓冲液中加混合型蛋白酶抑制剂，这怎么解？
如果PMSF失效了，但是我再加入混合型蛋白酶抑制剂，是不是也能用呢？
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3楼2019-10-22 13:13:14
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花随人愿

银虫 (小有名气)
具体可能是针对的蛋白酶种类不同，是的，最好的情况当然是都不失效呢。

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4楼2019-10-22 20:13:37
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