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大白菜1

金虫 (著名写手)

[求助] 中压液相制备不纯 已有2人参与

我用波士顿ODS柱在biotage液相色谱仪上分离样品,峰型很好,后出的一个杂质明显分开了,但是把目标峰用HPLC分析,还是有10%的后面那个杂质。是柱子不行吗?

@学术巨星 发自小木虫Android客户端
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S8032

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
收集的窗口再窄一些
2楼2019-10-18 09:42:08
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大白菜1

金虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by S8032 at 2019-10-18 09:42:08
收集的窗口再窄一些

问题是杂质峰明显在目标峰后面被分开了呀,怎么还会有少许包在目标峰里面?

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3楼2019-10-18 11:45:26
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科研000000

至尊木虫 (职业作家)

中压层析柱子短,分离效果可能没那么好,可以再上制备液相

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4楼2019-10-18 16:16:08
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S8032

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 大白菜1 at 2019-10-18 11:45:26
问题是杂质峰明显在目标峰后面被分开了呀,怎么还会有少许包在目标峰里面?
...

你的目的是尽快分到足够的东西做下面的工作,而不是再纠缠
5楼2019-10-19 11:30:55
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大白菜1

金虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by S8032 at 2019-10-19 11:30:55
你的目的是尽快分到足够的东西做下面的工作,而不是再纠缠...

这已经是最终产品了

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6楼2019-10-19 12:56:47
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liu.qinsheng

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你看着是分离的单一峰,但是这个不等于就是纯的,因为受制于柱子分离效果的原因,那个单一峰里面含有一定量的杂质是很正常的,同理,即使你在HPLC上面显示是一个单一峰,实际上也未必是纯品,有的仅仅是在这个浓度、进样量下,仪器分辨不出来而已,就像是世界上不存在纯品一样的原理,这么说你明白了吧
7楼2019-11-15 20:05:49
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大白菜1

金虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by liu.qinsheng at 2019-11-15 20:05:49
你看着是分离的单一峰,但是这个不等于就是纯的,因为受制于柱子分离效果的原因,那个单一峰里面含有一定量的杂质是很正常的,同理,即使你在HPLC上面显示是一个单一峰,实际上也未必是纯品,有的仅仅是在这个浓度、 ...

对的。可能是样品太浓,夹带了一些杂质出来了。需要减少进样量,或者延长分离时间。

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8楼2019-11-16 14:14:13
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