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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 菌种资源 » 大肠杆菌平板计数，涂板不长菌
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安静de执着14

新虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by sy0621 at 2019-10-16 14:00:11
蛋白琼脂膏和肉汤，稀释度很低了，原菌液也没长菌，营养缺陷型，可以用灭菌水稀释吗？...

既然是营养缺陷型的，那你用一般的培养基培养不出来，需要另外添加营养物质。

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11楼2019-10-16 14:22:44
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金刚太郎

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sy0621 at 2019-10-16 13:43:25
一样的，你用的PBS吗？pH=7.4吗？用水可以吗？...

原液都不长，那肯定是你的菌种出了问题，跟稀释液稀释度没什么关系。你说了是营养缺陷型，肯定是菌培养出了问题，再重复一边，记录每个地方的操作，看结果找问题。

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12楼2019-10-16 15:27:05
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原子核555

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
原菌液也没长，可以先镜检看看菌的情况，有可能没菌，也有可能是污染了。
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13楼2019-10-16 17:08:54
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sy0621

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 张香玲1017 at 2019-10-16 14:09:06
一般是不会的，你用原液再试试。...

昨天试了，今天还是没长菌
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14楼2019-10-17 09:03:52
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sy0621

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 张香玲1017 at 2019-10-16 14:10:19
如果使用原液也没有生长的话，考虑下你的培养液中是不是菌体还是培养基中沉淀物。...

传代后的菌种放在肉汤里 4℃保存，有大肠杆菌沉淀，用之前都在37℃复苏了，都摇起来了，涂板原液有时候长一两个菌落，其他都不长菌
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15楼2019-10-17 09:06:04
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sy0621

新虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 原子核555 at 2019-10-16 17:08:54
原菌液也没长，可以先镜检看看菌的情况，有可能没菌，也有可能是污染了。

镜检？光学显微镜可以看吗？看到的应该是什么现象呢？
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16楼2019-10-17 09:07:00
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sy0621

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 金刚太郎 at 2019-10-16 15:27:05
原液都不长，那肯定是你的菌种出了问题，跟稀释液稀释度没什么关系。你说了是营养缺陷型，肯定是菌培养出了问题，再重复一边，记录每个地方的操作，看结果找问题。
...

我买的是E.Coli O157:H7，反复试了，原液有时候会长一两个菌落，其他稀释的板都不见菌落
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17楼2019-10-17 09:11:01
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sy0621

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 安静de执着14 at 2019-10-16 14:22:44
既然是营养缺陷型的，那你用一般的培养基培养不出来，需要另外添加营养物质。
...

培养基都是买的现成的
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18楼2019-10-17 09:11:42
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路亚路亚

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by sy0621 at 2019-10-17 09:07:00
镜检？光学显微镜可以看吗？看到的应该是什么现象呢？...

直接吸一点菌液到玻璃片上，做革兰氏染色，光学显微镜100倍油镜就可以了。
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19楼2019-10-17 10:07:28
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sy0621

新虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by 路亚路亚 at 2019-10-17 10:07:28
直接吸一点菌液到玻璃片上，做革兰氏染色，光学显微镜100倍油镜就可以了。...

昨天做的，原液长菌了，稀释液没长菌，说明原液没问题，你们做平板计数时平板放置多久才涂板呢？
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20楼2019-10-17 11:06:21
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