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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » pET28a蛋白表达
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18考研sun

新虫 (初入文坛)

[求助] pET28a蛋白表达 已有1人参与

用0.4mmol/l的IPTG16度诱导过夜，蛋白都以包涵体的形式存在，为了增加蛋白的可溶性，有没有人有好的建议

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1楼 2019-10-15 10:12:20
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匿名

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2楼2019-10-15 13:39:40
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
换成融合蛋白表达载体吧，比如pet32a

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3楼2019-10-16 10:46:11
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18考研sun

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by HLYY at 2019-10-15 13:39:40
可以用低温诱导表达，28℃ 4-5小时或者16℃表达过夜、IPTG从0.1mM-1.0mM拉个梯度，摇床转速180转/min，这样不会让外源基因合成太快，可以减少包涵体蛋白形成。

我是用的16度诱导过夜的，会不会存在诱导时间过长蛋白降解的可能

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4楼2019-10-16 14:03:22
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匿名

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5楼2019-10-16 14:22:11
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6楼2019-10-16 14:22:58
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