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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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D.ypm

新虫 (小有名气)

[交流] pCas和pTargetF质粒用于基因编辑已有2人参与

pCas和pTargetF质粒用于大肠杆菌基因编辑时,前面各项步骤都没有问题,最后一步菌落PCR验证敲除菌株时,总是得不到想要的大小条带,望做过这类实验的童靴可以提供一些建议。
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)


2楼2019-10-13 14:05:26
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D.ypm

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2019-10-13 14:05:26
就是不好敲除

为什么呢

发自小木虫Android客户端
3楼2019-10-13 23:10:36
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大神救救我

铁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个是没敲掉吧,验过致死率了吗

发自小木虫IOS客户端
4楼2019-10-13 23:59:41
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D.ypm

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 大神救救我 at 2019-10-13 23:59:41
这个是没敲掉吧,验过致死率了吗

没敲掉,也应该出现没敲掉的条带呀

发自小木虫Android客户端
5楼2019-10-14 18:40:47
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大神救救我

铁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by D.ypm at 2019-10-14 18:40:47
没敲掉,也应该出现没敲掉的条带呀
...

那你是一条带都没有,还是出现非特异性扩增啊。反正不管出现什么问题,都是pcr出问题了。建议你把pcr条件改一下

发自小木虫IOS客户端
6楼2019-10-14 19:36:28
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D.ypm

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 大神救救我 at 2019-10-14 19:36:28
那你是一条带都没有,还是出现非特异性扩增啊。反正不管出现什么问题,都是pcr出问题了。建议你把pcr条件改一下
...

PCR条件都是按文献来的,不应该出现问题吧
7楼2019-10-16 12:04:47
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