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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 环境 » 环境生态 » 【求助】土壤提取DNA进行pcr反应问题
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小小木虫8580

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
kongsun(金币+1,VIP+0):^_^，谢谢提供信息，欢迎常来环境版！ 7-12 15:05
DNA需要纯化，不同土壤类型对DNA的干扰程度不一样，不一定你上次P的出来，这次就一定能P的出来，特别是比较肥沃的土壤，腐殖质干扰很大，建议最后用纯化试剂盒纯化。我们实验室是用MP公司 下属Qbiogene的专门提取土壤DNA的试剂盒bio101，效果非常好，但是价格很贵。
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11楼2009-07-06 23:32:35
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lengxing1555

金虫 (小有名气)
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Originally posted by jhcln at 2009-6-15 09:41:

我们实验室以前也做出来了，但是现在不知怎么回事，dna提出来了，就是pcr扩不出来，那以前提出来作为对照，对照却可以扩出来，我们也加bsa，还加了DMSO,找以前曾经做出过的师兄帮我们做也同样出现这种情况，我真 ...

你这种情况很正常，，有的基因在有的土壤中很难PCR出来，一种原因就是没有，另外一种原因就是土壤的成分影响了PCR
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12楼2009-09-09 12:26:48
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jhcln

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by pzhan1982 at 2009-6-5 08:58:
测一下DNA的纯度和浓度，干扰土壤DNA的杂质比较多，特别是腐殖酸、蛋白质等。不知道你用的什么公司的试剂盒，之前有人介绍用天根或者生工的，但价格有点高，大几百块钱，后面自己用手工提，效果还蛮好的，就是要用 ...

请问你们实验室是做真核的吗？我在做真核，从PCR,DGGE,切胶回收PCR，每一步都遇到问题，偶尔能出结果，再重复就不行了，希望大侠给予指点。
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13楼2009-09-13 20:33:12
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jhcln

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lengxing1555 at 2009-6-5 16:31:
土壤DNA提取后，PCR已经很多年了，我们实验室一直做，没什么问题

请问你们实验室是做真核的吗？我在做真核，从PCR,DGGE,切胶回收PCR，每一步都遇到问题，偶尔能出结果，再重复就不行了，希望大侠给予指点。
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14楼2009-09-13 20:35:29
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jhcln

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 小小木虫8580 at 2009-7-6 23:32:
DNA需要纯化，不同土壤类型对DNA的干扰程度不一样，不一定你上次P的出来，这次就一定能P的出来，特别是比较肥沃的土壤，腐殖质干扰很大，建议最后用纯化试剂盒纯化。我们实验室是用MP公司 下属Qbiogene的专门提取 ...

你好，看你的东西很受启发，能否加QQ聊聊？279130591谢谢
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15楼2009-10-11 22:04:21
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jhcln

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lengxing1555 at 2009-6-5 16:31:
土壤DNA提取后，PCR已经很多年了，我们实验室一直做，没什么问题

我们实验室困扰已久，能否请教一下？我的QQ279130591谢谢
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16楼2009-10-11 22:06:12
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